【摘 要】
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猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原，给养猪业带来巨大的经济损失。本研究以PCV2 GZ株为研究对象，经生物信息学软件分析其ORF2抗原性的分布特点，参照资料报道，选定ORF2基因的主要抗原位点分布区域(tORF2)，PCR扩增后亚克隆至表达载体pET32a，构建重组表达质粒pET-tORF2并转化大肠杆菌RosettaⅡ(DE3)。经IPTG诱导后进行聚
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广东,广州 510642 湖南益阳市赫山区畜牧水产局,湖南,益阳 41300
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会
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猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原，给养猪业带来巨大的经济损失。本研究以PCV2 GZ株为研究对象，经生物信息学软件分析其ORF2抗原性的分布特点，参照资料报道，选定ORF2基因的主要抗原位点分布区域(tORF2)，PCR扩增后亚克隆至表达载体pET32a，构建重组表达质粒pET-tORF2并转化大肠杆菌RosettaⅡ(DE3)。经IPTG诱导后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析(SDS—PAGE)以及蛋白免疫印迹试验(Western-blot)，结果表明重组蛋白分子量约为40kDa，表达量约为菌体总蛋白的27％，重组蛋白具有良好的抗原性，为PCV2亚单位疫苗的进一步研制奠定了基础。
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以鸡源鲍氏志贺菌为研究对象，分别根据G-enBank中登陆的相应序列针对八个管家基因thrB/th，trpC/trpB,purM/purN,mdh/R设计8对引物，用鸡源鲍氏志贺菌基因组DNA为模板，分别扩增出八个目的基因，并克隆到PMD18-T vector中，进一步进行了序列测定。序列测定结果已经登陆C-enBank(按照上述顺序登陆号分别为：DQ995264，DQ995265，DQ99526
目的：研制检测LM的胶体金试纸。方法：原核表达ActA蛋白并进行亲合层析纯化；检测表达蛋白ActA的免疫原性；以表达的蛋白为检测抗原研制LM单克隆抗体；利用所制备的单抗建立检测LM的胶体金试纸方法，并对试纸的特异性、敏感性及模拟样品进行试验。结果：在大肠杆菌中表达了ActA蛋白，纯化蛋白的纯度在90％以上；表达蛋白诱导了特异性的细胞免疫和体液免疫，具有良好的免疫原性；获得了4株抗ActA单抗；研制
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为探讨猪链球菌2型(Streptococcus suis typc2，SS2)次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)的生物学特性及其致病的相关性，选用自杀性质粒，通过同源重组成功构建具有氯霉素基因缺失株IMPDHm。PCR鉴定，IMPDH基因被cat基因表达盒所代替；Western blot鉴定，IMPDH单抗没有检测到相应的IMPDH蛋白。IMPDHm培养特性和致病性发生较明显的变化，其利用糖的能力
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