限制性内酶切法在uPA-SCID小鼠定型中的应用

来源 :华东地区第13届实验动物科学学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:singularity1234
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目的:建立一种简便、快捷、准确的定型方法用于uPA-SCID小鼠的定型,为建立人肝嵌合uPA-SCID小鼠模型做基础. 方法:1.uPA-SCID小鼠uPA基因定型,抽提小鼠基因组DNA,对其进行PCR扩增后,进行电泳鉴定.2.uPA-SCID小鼠SCID基因定型,抽提小鼠基因组DNA,将uPA-SCID小鼠SCID基因DNA的PCR扩增产物用Alu1进行酶切,对酶切产物进行电泳鉴定. 结果:1.uPA-SCID小鼠uPA基因定型,如果是uPA-SCID小鼠UPA基因野生型在153bp有条带,纯合子在337 bp有条带,杂合子在337 bp、153 bp有条带.2.uPA-SCID小鼠SCID基因定型,如果是uPA-SCID小鼠SCID基因突变体在38 bp,26 bp有条带,杂合子有在64bp,38 bp,26 bp有条带,野生型在64bp有条带. 结论:通过这种方法可以确定UPA-SCID小鼠的基因型,筛选出需要的纯合子uPA-SCID小鼠.该定型方法简便、易行,定型结果客观,可以应用于uPA-SCID小鼠的基因定型.
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