基质刚度对人牙周膜细胞增殖和铺展的影响

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目的建立水凝胶负载的人牙周膜细胞复合培养模型,通过比较不同刚度基质对人牙周膜细胞的生长和铺展的影响,探索新型材料负载下此类细胞的基本增殖状态。方法采用组织块配合酶消化法获得人牙周膜细胞,将人牙周膜细胞接种于不同刚度的水凝胶(Gel MA)基底上,形成水凝胶负载的人牙周膜细胞复合培养模型。采用不同弹性模量(刚度)的水凝胶作为细胞培养的基底材料,利用CCK-8法观察不同基底刚度上的水凝胶和孔板中的人牙周膜细胞1、3、5、7天的光吸收值(OD)值,绘制生长曲线进行细胞增殖活性的评价。选取4h、12h、24h的细胞,对细胞骨架进行染色,比较不同时间点细胞和细胞骨架的形态学变化,初步确定适合其生长的刚度范围。结果 1)生长于不同基底刚度的人牙周膜细胞,OD值没有显著性差异,孔板(弹性模量远大于Gel MA水凝胶基底)中的细胞增殖明显强于水凝胶各组;2)不同基质刚度下细胞的形态没有显著的差异,且形态较培养皿里差异不大,生长状态良好。结论 1)新型水凝胶材料具有良好的生物性,人牙周膜细胞生长良好;2)培养基质刚度不同,细胞增殖状态和铺展形态略有差异。
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