论文部分内容阅读
目的:肾小球足细胞是肾脏固有细胞之一,参与构成肾小球滤过屏障。许多肾脏疾病中均发现有足细胞的损伤,包括胞体变小、足突融合、足细胞的丢失等。当足细胞丢失、出现蛋白尿,肾脏功能将逐渐减退,最终甚至需要肾脏替代治疗。醛固酮(Aldosterone,Aldo)一种主要由肾上腺皮质产生的类固醇类激素,除了调节水电解质和血压的动态平衡,还是肾损伤的重要介质,包括促进炎症因子的释放、组织重塑、肾脏纤维化等。过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator1α,PGC-1α)主要存在于心肌、脂肪、肝脏、肾脏等线粒体丰富的组织中,可调节线粒体生物发生、糖代谢、脂肪酸氧化等诸多生物过程。本研究的目的在于探讨PGC-1α在Aldo诱导的肾小球足细胞损伤中的作用。方法:体外培养小鼠肾小球足细胞,Aldo刺激足细胞后,应用MitoSOX检测线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS),Western blot检测nephrin、PGC-1α的表达;免疫荧光对足细胞PGC-1α的表达进行定位;在足细胞内过表达及下调PGC-1α后,应用Real-time PCR、Western blot检测过氧化物还原酶3(peroxiredoxin 3,Prx3)、过氧化物还原酶5(peroxiredoxin 5,Prx5)、超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD2)的表达。结果:1、Aldo可诱导足细胞线粒体内ROS产生增加以及足细胞损伤标志蛋白nephrin表达下降,且以上结果可被超氧化物歧化酶类似物锰四卟啉(MnTBAP)抑制;2、足细胞中PGC-1α主要表达在胞质中,Aldo呈剂量依赖诱导PGC-1α表达减少;3、PGC-1α过表达后加Aldo刺激组,nephrin表达明显增加;4、PGC-1α过表达显著上调Prx3、Prx5、SOD2的表达量,而PGC-1α表达抑制后,Prx3、Prx5、SOlD2的表达量则下降。结论:PGC-1α通过增强足细胞抗氧化酶的表达参与调节氧化应激,抑制Aldo诱导的足细胞损伤。