目的:卵黄蛋白原基因(Vg)在鱼类生殖过程中有着重要功能，由于Vg受雌激素类物质的诱导，鱼类Vg作为一种有效的生物标志物已被广泛应用于环境污染物的评价。本研究通过对剑尾鱼卵黄蛋白原基因片段的克隆和表达，建立剑尾鱼卵黄蛋白原蛋白检测方法。为剑尾鱼生殖生理及环境应用等不同领域研究打下重要基础。 方法:利用逆转录PCR(RT-PCR)，末端快速扩增(RACE)等方法，从17 B雌二醇诱导的剑尾鱼肝脏中提取RNA并扩增出卵黄蛋白原目的基因，而后克隆到pMD18-T载体中，鉴定后进行序列测定并拼接全长。在对该序列所编码氨基酸可能抗原位点分析的基础上，选取771bp的核心序列，进行PCR改造构建原核表达载体，预期得到258个氨基酸的表达蛋白。以重组蛋白免疫新西兰大白兔，获得抗血清。雌激素(17 β-雌二醇)对剑尾鱼诱导后，用重组蛋白抗血清作一抗，进行Western-blot分析。 结果:首次克隆到剑尾鱼卵黄蛋白原A全长cDNA序列，VgA cDNA全长5159 bp，5和3非编码区分别为16 bp和85 bp，含有一个5058 bp的开放阅读框，编码1685个氨基酸，推测其编码氨基酸分子量大小为187.2 kD。所得序列具有Vitellogenin结构域、VWFD结构域和多聚丝氨酸结构域。构建了VgA核心片段原核表达质粒，经诱导表达后得到29kDa的表达蛋白。Westernblot分析表明，该重组蛋白抗血清可应用于剑尾鱼卵黄蛋白原的检测。 结论:本研究首次克隆到剑尾鱼卵黄蛋白原A基因全长cDNA序列，对其部分序列进行表达，建立了剑尾鱼VgA的检测方法。