【摘 要】
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LAMP(loop-mediated isothermal amplification)法检测转基因作物，是通过一对特异的能识别一段正义链序列和一段反义链序列的内引物和一对链置换引物，在无外切酶活性的Bst DNA聚合酶作用下，以恒温条件实现对外源转基因成分的扩增，并在反应结束后加入显色液，肉眼即可实现对反应结果进行判读。目前，常用的转基因检测方法是PCR法，PCR法检测转基因依赖控温精确的PCR
【机 构】
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广州华峰生物科技有限公司，广州 510663 广州华峰生物科技有限公司，广州 510663 华南理
【出 处】
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CFAS2012——2012中国食品与农产品质量安全检测技术应用国际论坛
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LAMP(loop-mediated isothermal amplification)法检测转基因作物，是通过一对特异的能识别一段正义链序列和一段反义链序列的内引物和一对链置换引物，在无外切酶活性的Bst DNA聚合酶作用下，以恒温条件实现对外源转基因成分的扩增，并在反应结束后加入显色液，肉眼即可实现对反应结果进行判读。目前，常用的转基因检测方法是PCR法，PCR法检测转基因依赖控温精确的PCR仪，而LAMP法检测转基因能在任何提供63℃左右恒温条件的仪器中进行，例如水浴锅，恒温金属浴等。另外，本文中的改良LAMP法检测转基因使用HF管进行反应，与普通PCR管不同，HF管中有两个独立的分区，大区为反应液区，小区为显色液区，LAMP反应结束后，只需将这两个区域的液体颠倒混匀即可对结果进行判读，避免了开管操作反应产物随气溶胶逸出，对实验室造成污染，提高了检测的稳定性。本文还通过改良LAMP法对转基因作物中常见的烟草花叶病毒35S启动子(P-CaMV35S)、胭脂碱合成酶基因终止子(T-NOS)进行了检测，检出限能达到0．5％或更高，能基本满足作物转基因筛查。
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