【摘 要】
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目的 DL0309是从民族药滇白珠提取的活性化合物,具有很好的抗炎、镇痛作用.本实验研究DL0309的抗炎机制.方法 采用MTT法检测DL0309对小鼠巨噬细胞RAW264.7的毒性作用.采用脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7建立细胞炎症反应模型,分别设空白对照组,LPS处理组(模型组),2,10,50 μmol·L-DLL0309处理组；加入终浓度为0.5 μg·ml-1的LPS进
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院药物研究所,北京100050
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目的 DL0309是从民族药滇白珠提取的活性化合物,具有很好的抗炎、镇痛作用.本实验研究DL0309的抗炎机制.方法 采用MTT法检测DL0309对小鼠巨噬细胞RAW264.7的毒性作用.采用脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7建立细胞炎症反应模型,分别设空白对照组,LPS处理组(模型组),2,10,50 μmol·L-DLL0309处理组；加入终浓度为0.5 μg·ml-1的LPS进行造模,同时加入不同浓度的药物继续培养24 h,分别采用Griss法测定细胞上清液中NO的含量,ELISA法测定TNF-α、IL-6的含量；Western blot法测定RAW264.7细胞中iNOS,cox-2蛋白的表达,以及phospho-NF-κB p65,NF-κB p65,phospho-p38,JNK,ERK MAPK,p38,JNK、ERK MAPK的表达.结果 DL0309≤50μmol·L-1浓度范围内对巨噬细胞无细胞毒作用,能显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞NO,TNF-α、IL-6的生成,下调LPS诱导RAW264.7细胞中iNOS和cox-2蛋白的表达,抑制LPS刺激NF-κB和MAPKs的磷酸化活化.结论 DL0309可能是通过影响NF-κB和MAPKs信号通路,下调iNOS和Cox-2蛋白的表达,抑制炎症介质NO,TNF-α和IL-6的生成,从而发挥抗炎作用.
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