【摘 要】
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目的 观察低频电磁场(Low Frequency Electromagnetic Field,LFEMF)在表皮干细胞(Epidermal Stem Cells,ESCs)移植再生毛囊中的作用,同时观察此过程中低频电磁场对微环境中影响表皮干细胞增殖分化的β-catenin,骨形态发生蛋白4(Bone Morphogenetic Protein 4,BMP4)表达的影响,为解决毛发缺失问题提供新的治
【机 构】
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暨南大学第一临床学院,广东 广州 510630 广东省人民医院康复医学科,广东省老年医学研究所,广
【出 处】
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第六届粤港澳台物理医学与康复学学术会议暨2015年广东省医学会物理医学与康复学学术年会
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目的 观察低频电磁场(Low Frequency Electromagnetic Field,LFEMF)在表皮干细胞(Epidermal Stem Cells,ESCs)移植再生毛囊中的作用,同时观察此过程中低频电磁场对微环境中影响表皮干细胞增殖分化的β-catenin,骨形态发生蛋白4(Bone Morphogenetic Protein 4,BMP4)表达的影响,为解决毛发缺失问题提供新的治疗策略.方法 分离培养SD乳鼠ESCs,CM-Dil进行体外标记,将标记的ESCs和新鲜分离的真皮细胞,按1：2比例混合,行裸鼠背部皮下注射移植,成功造模的裸鼠随机分为ESCs移植组(E组)和LFEMF干预下ESCs移植组(LE组),另设培养基注射为空白对照组(C组).LFEMF组采用50Hz、5mT磁场干预,1h/d,连续干预14d,HE染色法观察再生毛囊形态学改变,免疫荧光检测移植细胞存活率,荧光定量PCR法和Western-blot检测β-catenin、BMP4表达情况.结果 分离培养的表皮干细胞生长迅速,快速融合,呈典型铺路石样改变；肉眼和HE染色提示：LE组再生的毛囊数量及长度均高于对照组,而C组未见毛囊再生；免疫荧光显示：E组和LE组皮肤组织切片中均可见红色荧光,说明移植的细胞存活；相比E组,LE组可见更多的红色荧光,说明移植细胞在磁场组存活率较高；红色荧光主要分布在再生毛囊的毛母质及毛干区,说明移植的干细胞参与再生毛囊上皮构建.C组未见荧光表达；荧光定量PCR及Western-blot检测结果表明随着时间的推移E组和LE组β-catenin、BMP4基因和蛋白表达都呈上升趋势,LE组较E组上升更明显.且两组中β-catenin表达量高于BMP4,差别具有统计学意义(P＜0.05).结论 本研究证实表皮干细胞作为毛囊再生的种子细胞的可行性,低频电磁场可促进表皮干细胞移植再生毛囊,这可能与其动态协调干细胞微环境中的β-catenin,BMP4表达有关.
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