【摘 要】
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本研究根据GenBank已发表的猪葡萄球菌的6种脱落毒素基因序列,设计合成了6对相应的特异性引物,通过特异性、敏感性和重复性试验建立了可行的多重PCR检测方法。用该方法对临床
【机 构】
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广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室; 内蒙古农业大学兽医学院;
【基金项目】
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广东省生猪科技创新体系岗位专家专项(2008A020100020);广东省农业科技攻关项目(2007A020300006);广东省自然基金重点项目(06105311);促进科技服务业发展专项(2010A040301010)
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本研究根据GenBank已发表的猪葡萄球菌的6种脱落毒素基因序列,设计合成了6对相应的特异性引物,通过特异性、敏感性和重复性试验建立了可行的多重PCR检测方法。用该方法对临床分离到的9株猪葡萄球菌进行检测,均扩增出了与预期大小相符的23SrDNA(662bp)条带;同时,其中6株分别扩增出了ExhA(316bp,2株)、ExhC(525bp,2株)和ShetA(814bp,2株)基因特异性条带;另外3株均未扩增出任何毒素基因特异性条带,鉴定为无毒力菌株,以上结果与生化鉴定及普通PCR检测测序结果一致。结果表明,本研究所建立的多重PCR方法不仅操作快速方便、节约实验成本,而且具有高度特异性、敏感性和良好的重复性,可用于仔猪渗出性皮炎的诊断和猪葡萄球菌的快速鉴定。
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