目的:本项目通过在脱细胞角膜基质(ACM)上复合羊膜上皮细胞(AEC)制备成具有天然角膜类似结构功能的组织工程角膜,用于角膜移植以达到支架材料与植床良好整合,并有效抑制角膜血管化,瘢痕化,达到长期修复角膜损伤的作用. 方法:通过在ACM上皮面分三次接种AE细胞,再经4天器官培养,使AEC细胞在ACM上形成5-6层类似正常角膜上皮层的细胞层.将构建成功的组织工程角膜TEC和ACM分别于兔眼表进行板层移植,评估TEC和ACM植入组角膜上皮化,血管化以及瘢痕化程度,比较观察角膜长期透明化程度.并在该过程中定点取材,分别于TEC组和ACM组移植后7天,14天,28天,60天取材,检测材料与植床的整合效果,并分别检测不同组别不同时间点下角膜血管化相关因子,瘢痕化相关因子和免疫相关因子的表达,从调节血管化,瘢痕化以及免疫反应的角度初步探索TEC改善植床微环境的机理. 结果:构建的TEC角膜在形态结构上与正常角膜较为类似，AEC细胞层可以稳定附合在ACM上皮面，形成类似角膜上皮层的细胞层。动物实验显示兔眼表TEC植入组愈后效果明显优于ACM植入组，TEC组支架材料透明度，上皮化恢复程度得到改善且材料与植床整合效果良好，角膜血管化，瘢痕化程度得到明显抑制。 结论:利用脱细胞角膜基质和羊膜上皮细胞构建的新型组织工程角膜是一种可以有效修复角膜损伤的角膜替代物，具有重要的临床研究意义。