肝细胞生长因子基因修饰的脐带间充质干细胞促进鼻黏膜创伤愈合的实验研究

来源 :第十五次中国中西医结合耳鼻咽喉科专业委员会年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:reeyung
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目的:探讨过表达肝细胞生长因子的人脐带间充质干细胞对鼻黏膜上皮和兔鼻窦黏膜机械损伤模型的修复作用。 方法:通过酶消化法和组织块培养法分离hUC-MSCs,胰酶消化1:3传代扩增。使用腺病毒载体构建了含有HGF基因的重组腺病毒(Ad-HGF),以MOI=100转染hUCMSCs(HGF-MSCs),PCR以及ELISA鉴定HGF在HGF-MSCs中的表达;体外原代培养鼻上皮细胞,建立鼻茹膜上皮机械划痕模型,利用hUCMSCs以及HGF-MSCs的条件培养液观察对上皮愈合能力的影响,并采用CCK-8法检测其能否促进上皮细胞增殖。建立兔上领窦茹膜机械损伤模型。 结果:两种方法均能获得足量原代hUC-MSCs,并且符合国际干细胞协会标准。hUCMSCs条件培养液可促进鼻上皮细胞增殖、划痕愈合,通过过表达HGF能够增强这种效应。在HGF-MSCs组中,其胶原沉积明显下降,并且能够降低TGF-betal在损伤组织中的浓度。 结论:成功从人脐带中分离培养hUC-MSCs,并且符合国际标准;hUC-MSCs能在体外促进鼻茹膜上皮增殖、划痕愈合,体内移植能促进茹膜的愈合,部分能分化为上皮和纤毛细胞。HGF-MSCs不仅具有增强以上效应还能降低组织修复时胶原沉积以及纤维化程度。
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