【摘 要】
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根据Zadori等发表的鹅细小病毒(goose parvovirus,GPV)B株(GPV B株)基因组核苷酸序列设计并合成了一对引物(P1和P2)，对鹅细小病毒长春强毒株(GPV CC株)主要结构蛋白VP2和VP3基因进行扩增，所获得的PCR产物与预期片段大小相符，约1.8kb。将该片段直接克隆进真核表达T载体pCR3.1。经鉴定，证实构建了含有GPV主要结构蛋白基因的原核表达载体。将该表达载体
【机 构】
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解放军军需大学动物科技系(长春) 解放军军需大学 动物科技系(长春)
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十次学术研讨会
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根据Zadori等发表的鹅细小病毒(goose parvovirus,GPV)B株(GPV B株)基因组核苷酸序列设计并合成了一对引物(P1和P2)，对鹅细小病毒长春强毒株(GPV CC株)主要结构蛋白VP2和VP3基因进行扩增，所获得的PCR产物与预期片段大小相符，约1.8kb。将该片段直接克隆进真核表达T载体pCR3.1。经鉴定，证实构建了含有GPV主要结构蛋白基因的原核表达载体。将该表达载体经双酶切后，定向克隆进pET-28b(+)，经鉴定证实为含有目的的基因的原核表达载体(pG)，为高效原核表达以及研制更为有效的基因工程疫苗打下了基础。
其他文献
通过光镜、电镜等方法对鸡马立克氏病羽髓组织进行了形态学研究。结果明显，羽髓远端坏死，羽髓中有多量肿瘤细胞浸润、肿瘤细胞弥漫性或局部性浸润。电镜观察，肿瘤细胞核异型性明显，核膜凹陷，核内出现假核内包含物。在一些羽髓中，巨噬细胞吞噬肿瘤细胞较多见，而且观察到一些肿瘤细胞发生凋亡。研究结果表明，鸡马立克氏病羽髓病变十分明显，羽髓的形态学变化可用于鸡马立克氏病的诊断。
以45000个蚀斑单位的剂量接种1日龄雏鸡，饲养观察至120日龄，解剖肉眼观察无任 何MD特异性病理变化。试制的三批疫苗分别接种1日龄雏鸡，7日龄雏鸡时用京-1株强毒攻击，饲养至60日龄。保护指数可达90-100。免疫荧光试验(IFA)对CVI988/Rispens接毒与Ⅰ型 马立克氏病病毒(MDV)gB抗原的单克隆抗体反应显示识别性荧光。对照毒株的血清型Ⅱ型SB-1、Z4和ⅢHVT无荧光反应。种
通过对国内“鸡传染性腺胃病”病原分离、鉴定、病原分离株的抗原性和血清型分析、病原分离株S1纤突基因克隆、全序列测定等多方面系统研究和分析比较，作者首次在国内提出该病是致腺胃变型为特征的鸡传染性支气管炎病毒。
将含IBVSD株S1基因的质粒PMD18-T-S1酶切，回收纯化S1基因并与pFASTBAC-THa连接 ，转化DH5a，经鉴定后制备重组SD S1 Bacmid DNA。序列测定后，转染SF9细胞，制备重组 病毒。免疫荧光检测，S1表达阳性，Western blot检测有90Kda大小的一条蛋白。
禽流感自一百多年前，在意大利发现流行以来，在许多国家都有各种亚型禽流感的暴发和流行。近几年，中国部分地区也发现了H9亚型禽流感的流行，引起鸡群生产性能的下降，损失严重。因禽流感有广泛传播、临床症状和病理变化易于与其他疫病相混淆的特点，易误诊或延误治疗，从而易造成巨大的经济损失，故应引起各界的高度重视，并应在全国范围内大力加强对H9亚型禽流感的鉴别诊断、预防和防制。
用NDLaSota弱毒株、EDS76毒株、IBD地方分离株-JD2及D78株，分别接种鸡胚、鸭胚，收集尿囊液等含毒组织，结合JD2囊组织毒，制备各种病毒抗原液，经福尔马林灭活后按一定比例混合，再加入含硒免疫增强剂，与白油佐剂乳化成油包水型三联乳剂疫苗。对三联苗各项技术指标进行了测定，证明本疫苗安全、无副作用，接种后2-3周产生免疫保护，ND和EDS76攻毒保护率为100℅。通过免疫抗体检测，该三联
该研究研制出鸡传染性鼻炎PCR试剂盒和阻断ELISA试剂盒。PCR试剂盒可直接检测病 料中的病原DNA，可测出1Pg的DNA和10～10细菌，对可疑病料的检出率是传统的细 菌分离方法的2～3倍，对常见病原菌(非Hpg)的检测结果均为阴性，可重复性好，特异性为100℅，阻断ELISA试剂盒可检测副鸡嗜血杆菌(Hpg)型特异性抗体，其种特异性为100℅，型 特异性〉99℅，且具有较好的敏感性，重复性好
应用RT-PCR技术对新城疫病毒(NDV)Y98株的F基因重要功能区片段扩增、克隆后进行 序列测定，并与多株已报导的NDV参考株相应片段进行序列比较，经遗传基因进化树分析后 ，首次报导了基因VⅡ型DNV分离株在中国大陆的存在。
将AIV广东分离株A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)HA基因正向克隆于pSY538的EcoR I 位点，将LacZ报告基因插入Sma I位点，然后切取含外源基因和报告基因的Not I片段克隆于pSY681的Not I位点，构建AIV HA基因重组禽痘病毒转移载体，经酶切分析和PCR鉴定后，利用脂质转染试剂盒在鸡胚成纤维细胞上与F-017禽痘病毒弱毒苗株进行共转染。经重组病毒
纯化番鸭细小病毒国内毒株M91G27)病毒尿囊液，通过PCR技术，从病毒DNA中扩增出 病毒结构多肽VP3完整编码基因。将该PCR扩增片段克隆到pUC18质粒载体的Hinc Ⅲ和Sac I 位点之间，酶切分析筛选到含1.6Kb基因片段的重组质粒MP13，进一步对该片段进行序列测 定及用CLONE软件分析该序列。结果表明，其与国外已报道毒株核苷酸序列有98.8℅的同源 性，氨基酸序列有98.1℅的同