【摘 要】
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将含IBVSD株S1基因的质粒PMD18-T-S1酶切，回收纯化S1基因并与pFASTBAC-THa连接 ，转化DH5a，经鉴定后制备重组SD S1 Bacmid DNA。序列测定后，转染SF9细胞，制备重组 病毒。免疫荧光检测，S1表达阳性，Western blot检测有90Kda大小的一条蛋白。
【机 构】
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郑州牧业工程高等专科学校(郑州) 郑州牧业工程 高等专科学校(郑州)
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十次学术研讨会
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将含IBVSD株S1基因的质粒PMD18-T-S1酶切，回收纯化S1基因并与pFASTBAC-THa连接 ，转化DH5a，经鉴定后制备重组SD S1 Bacmid DNA。序列测定后，转染SF9细胞，制备重组 病毒。免疫荧光检测，S1表达阳性，Western blot检测有90Kda大小的一条蛋白。
其他文献
根据发表的AEV序列设计一对引物，利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术，在体外从AEV分离株L2Z株感染的SPF鸡胚病变组织中扩增出VP0基因。将VP0基因克隆到质粒pBssK载体的Kpn I酶切位点上，构建成含有VP0基因的重组质粒VP0-pBssK。进一步序列分析表明 ，该基因长726bp，编码242个氨基酸，与AEV1143株的核苷酸和氨基酸的同源性分别为95.2 ℅和97.5℅。
用SPF鸡胚分别从不同患病鸡群分离到4株病毒，经病毒形态、结构、理化和生物学特性、血清学等研究，该病毒为禽副粘病毒Ⅰ型；根据国际上规定三项判定新城疫毒力的标准，4株病毒均具有与新城疫病毒速发型相似的毒力，属于强毒力的毒株；人工感染71周龄SPF鸡均100℅发病致死；应用一株鹅副粘病毒制备的单克隆抗体，获得具有对禽副粘病毒Ⅰ型共同的单抗和仅对鹅副粘病毒毒株和鸡副粘病毒毒株阳性反应，而对新城疫F48E
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以干酪乳杆菌L.casei34103染色体DNA为模板，利用PCR技术扩增出胸苷酸合成酶ThymidylatesynthasemthyA)基因，回收纯化。选择以红霉素抗性为选择压力的可以在大肠杆菌和乳酸菌中穿梭表达的质粒pW425e为基本质粒，以thyA基因取代红霉素基因，获得重组载体并鉴定。此重组载体可以对thyA基因缺陷的大肠杆菌X51和嗜酸乳杆菌DOMLaS107进行功能弥补，即可以在没有外
新城疫病毒(NDV)四平株、昌黎株、青岛株、F48E8株分别接种9日龄SPF鸡胚增殖，蚀班纯化(三代)，生物学特性鉴定及结合基因离列分析表明，这四个毒株HN基国酸长度均为1713bp，编码571个氨基酸，其中四平株和F48E8株含有5个糖基化位点，青岛株和昌黎株衾有6个糖基化位点，四平株含有12个半胱氨酸残基，而昌黎株、青岛株和F48E8株含有13个半胱 氨酸残基。三个野生毒株与F48E8相比较，
对自患病鹅群分离的一株鹅副粘病毒(GPV)YG97株经经细胞凝集(HA)和红细胞凝集抑 制(HI)试验证明与NDV存在着极大的相关性。参考NDV的三个毒力指标－最小致死量鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄鸡脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄鸡静脉拉致病指数(IVPI)对YG97 株了进行了测定，表明其具有与DNV速发型相类似的毒力，属强毒力毒株。应用RT-PCR技术 对的F基因重要功能区片段扩增
以10的低致病性禽流感病毒(Lowly pathogenic awian influenza virus,LPAIV)气管内注射10日龄SPF鸡，24小时后，重复感染一次；48小时后，气管内注射禽病原性大肠杆菌353(O18)、120(018)、037(O78)、166(O78)、058(O2)、536(O88)、132(O11)和173(O26)株，3×10CFU/羽，连续观察5天。结果：LPA
通过光镜、电镜等方法对鸡马立克氏病羽髓组织进行了形态学研究。结果明显，羽髓远端坏死，羽髓中有多量肿瘤细胞浸润、肿瘤细胞弥漫性或局部性浸润。电镜观察，肿瘤细胞核异型性明显，核膜凹陷，核内出现假核内包含物。在一些羽髓中，巨噬细胞吞噬肿瘤细胞较多见，而且观察到一些肿瘤细胞发生凋亡。研究结果表明，鸡马立克氏病羽髓病变十分明显，羽髓的形态学变化可用于鸡马立克氏病的诊断。
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