桃叶珊瑚苷通过Nrf2/AMPK信号通路对NAFLD的作用及分子机制

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[目的]非酒精性脂肪肝(NAFLD)是慢性肝病最常见的病因,最终能发展为肝纤维化甚至肝细胞癌。桃叶珊瑚苷(AU)是桃叶珊瑚的主要活性成分,具有抗炎、保肝等多种作用。本研究探讨了桃叶珊瑚苷对泰洛沙泊诱导的NAFLD小鼠及载脂蛋白C-Ⅲ(apoC-Ⅲ)诱导的3T3-L1细胞的作用及分子机制。[方法]体内实验中,应用桃叶珊瑚苷刺激泰洛沙泊(300mg/kg)诱导的C57BL/6小鼠,24小时后取血清测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、高密度脂蛋白(HDL)、单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、血管细胞黏附因子1(VCAM-1)、细胞间黏附因子1 (ICAM-1)、基质金属蛋白酶9 (MMP-9)、载脂蛋白CⅢ(ApoC3)含量;取肝脏制作H&E和油红切片;测定肝脏中Nrf2/HO-1和AMPK/AKT信号通路相关蛋白表达情况;体外实验中,桃叶珊瑚苷预处理apoC-Ⅲ诱导的分化成熟的3T3-L1细胞,通过CCK-8实验检测不同浓度桃叶珊瑚苷(35、70、140μg/ml)对细胞增殖的影响并确定有效无毒浓度;ELISA检测细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6 (IL-6)的释放量和mRNA表达;蛋白免疫印迹法(western blot)检测核转录因子E2相关因子2/血红素氧合酶1 (Nrf2/HO-1)和AMPK/AKT信号通路相关蛋白表达。[结果]桃叶珊瑚苷能通过影响血清中TC、TG、LDL、VLDL、MPO、SOD、TNF-α、IL-1β和IL-6抑制NAFLD过程中的氧化应激和炎症;并激活了细胞内Nrf2、PPARα、PPARγ和HO-1,促进了AMPKα、AMPKβ、ACC和AKT的磷酸化。[结论]桃叶珊瑚苷通过其明显的抗炎和抗氧化作用,起到降血脂作用,并有望成为一种NAFLD的靶向新药。
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