【摘 要】
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目的 观察内源性及外源性H2S对大鼠离体心房肌细胞及心室肌细胞ATP依赖的钾通道(KATP)外向电流的影响,以探讨内源性及外源性H2S对心房肌细胞及心室肌细胞的作用及途径.方法 对大鼠离体心脏采用胶原酶酶解法得到单个心房肌细胞及心室肌细胞,采用膜片钳全细胞技术记录DL-propargylglycine (PPG)及不同浓度NaHS(外源性H2S的供体)干预前后的KATP电流.将酶解获得的心房肌细胞
【出 处】
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首都医科大学2013年研究生学术论坛
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目的 观察内源性及外源性H2S对大鼠离体心房肌细胞及心室肌细胞ATP依赖的钾通道(KATP)外向电流的影响,以探讨内源性及外源性H2S对心房肌细胞及心室肌细胞的作用及途径.方法 对大鼠离体心脏采用胶原酶酶解法得到单个心房肌细胞及心室肌细胞,采用膜片钳全细胞技术记录DL-propargylglycine (PPG)及不同浓度NaHS(外源性H2S的供体)干预前后的KATP电流.将酶解获得的心房肌细胞和心室肌细胞分别分为三组,第一组记录原始电流数据后,先后加用吡那地尔(10 μ mol/L)及格列苯脲(10 μ mol/L)进行细胞外灌流3min,记录电流数据.第二组于电极内液中加入PPG(200 μ mol/L),分别记录0 min、5 min、10 min、15 min、20 min和25min的电流.第三组记录细胞原始电流数据后,分别用NaHS(作为H2S的供体)终浓度分别取9.375 μ mol/L、18.75 μ mol/L、37.5 μ mol/L、75 μ mol/L、150 μ mol/L进行细胞外灌流3 min,记录电流数据.结果 1、心房肌细胞和心室肌细胞峰电流密度经格列苯脲干预后,同吡那地尔干预后相比分别被抑制了63％和67％,说明此通道对KATP电流的特异性阻断剂格列苯脲非常敏感,可以证明此为KATP电流.2、心房肌细胞加用PPG前峰电流密度为(6.9066±1.9029) pA/pF(n=6),经PPG干预后电流密度随时间的延长逐渐减小,自加用PPG5min(5.8179±1.4032pA/pF,P=0.056,n=6)开始电流密度同正常对照组相比有减小的趋势,但没有统计学意义,自10min(5.4328±1.2969 pA/pF,P=0.012,n=6)开始均具有统计学意义,至25min(3.9244±0.9885 pA/pF,P=0.000,n=6)时峰电流密度被抑制达到(43±13)％.3、心室肌细胞加用PPG前KATP峰电流密度为(5.3258±0.7556) pA/pF(n=6),自加用PPG 5 min(4.9679±0.7251pA/pF,P=0.232,n=6)开始峰电流密度随时间延长逐渐缩小,但5 min及10 min(4.7768±0.5389 pA/pF,P=0.072,n=6)记录到的电流同正常对照组相比有逐渐减小的趋势,但没有统计学意义,自15min(4.5129±0.4502 pA/pF,P=0.010,n=6)开始均具有统计学意义,至25 min (3.7856±0.4312 pA/pF,P=0.000,n=6)时KATP峰电流密度被抑制达到(29±6)％.4、心房肌细胞经NaHS灌流前峰电流密度为(6.5974±1.1527) pA/pF(n=6),经NaHS较低浓度即9.375 u mol/L(7.4403±1.5844pA/pF,P=0.232,n=6)干预后,KATP峰电流密度呈逐渐增加趋势,但尚不具有统计学意义.自37.5 u mol/L(9.1560±2.1164pA/pF,P=0.001,n=6)开始均具有统计学意义,至150 μ mol/L(10.4631±2.3297 pA/pF,P=0.000,n=6)时峰电流密度增加(59±1 8)％.5、心室肌细胞经NaHS灌流前峰电流密度为(6.6310±0.6092) pA/pF(n=6),经NaHS干预后KATP峰电流密度呈逐渐增加,但在较低浓度即9.375 μ mol/L(7.0810±0.7230 pA/pF,P=0.200,n=6)及18.75 μ mol/L(7.3199±0.7571 pA/pF,P=0.055,n=6)时尚不具有统计学意义.自37.5 μ mol/L(7.8825±0.7611 pA/pF,P=0.001,n=6)开始均具有统计学意义,至150 μ mol/L(9.0949±1.0259) pA/pF,P=0.000,n=6)时峰电流密度较NaHS干预前增加(37±6)％.结论：1、内源性H2S可以开放心房肌细胞KATP通道,使KATP电流增加.2、内源性H2S可以开放心室肌细胞KATP通道,使KATP电流增加.3、外源性H2S可以开放心房肌细胞KATP通道,使KATP电流增加.4、外源性H2S可以开放心室肌细胞KATP通道,使KATP电流增加.
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