经腰椎穿刺注射干细胞内耳移植新途径的探索研究

来源 :中华医学会2016全国耳鼻咽喉头颈外科中青年学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:manuka
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  目的 摸索建立一种在人类感音神经性耳聋大型哺乳动物模型上可行的内耳干细胞移植方法,检测经腰椎穿刺蛛网膜下腔注射移植的人诱导多能干细胞在Mitf基因突变耳聋猪的内耳及全身的分布情况,检测对听性脑干反应阈值的影响。方法 培养及鉴定人诱导多能干细胞。选择Mitf基因突变的荣昌猪作为神经性耳聋模型的实验对象,移植干细胞的荣昌猪为实验组,单纯注射生理盐水的荣昌猪为对照。将人诱导多能干细胞经蛛网膜下腔注射的途径移植到实验组荣昌猪体内。设置观察期为移植后1天、移植后3天和移植后7天,在移植前和处死前行全身麻醉后测定听性脑干反应阈值。按观察期的时间点处死动物取耳蜗及其他组织。制作冰冻组织切片,行免疫组织荧光染色,用人特异性抗体检测供体细胞。提取蛋白质,使用蛋白印迹法检测移植细胞蛋白的表达。提取RNA,使用RT-PCR法检测供体细胞基因在实验对象体内分布。
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Ramsay Hunt综合征,又称耳带状疱疹,1907年由Ramsay Hunt首先报道。是一种以耳廓或耳周等面神经膝状神经节的神经分布区域出现的特殊疱疹、周围性面神经瘫痪、听力下降和眩晕等症状为主要表现的一类少见疾病,常单侧发病。它是由潜伏在体内膝状神经节的水痘\带状疱疹病毒(varicella zoster virus,VZV)在一些诱因下的激发下而导致发病,病毒除侵犯面神经外,还可沿着神经走
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