【摘 要】
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目的：初步探索热损伤皮肤角质形成细胞(keratinocytes,KC)培养上清蛋白质的整体变化规律。方法：建立KC热损伤模型,收集正常培养及热损伤后12h的KC培养上清,超滤、冻干,获得蛋白样品。运用固相pH梯度双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分离正常及热损伤后KC培养上清中的总蛋白质,凝胶银染显色后选用ImageMaster 2D
【机 构】
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Burn Center of PLA, Xijing Hospital,the Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China
【出 处】
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第八届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术交流会
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目的：初步探索热损伤皮肤角质形成细胞(keratinocytes,KC)培养上清蛋白质的整体变化规律。方法：建立KC热损伤模型,收集正常培养及热损伤后12h的KC培养上清,超滤、冻干,获得蛋白样品。运用固相pH梯度双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分离正常及热损伤后KC培养上清中的总蛋白质,凝胶银染显色后选用ImageMaster 2D图像分析软件,进行比较分析识别差异表达的蛋白质。结果：(φ)正常培养及热损伤后KC培养上清凝胶的平均蛋白质点数分别为1898±113和1877±97,经匹配每张胶上用于统计学分析的点为1118个。(2)正常培养及热损伤后KC的双向凝胶电泳图谱中差异表达蛋白点数为26个,其中16个点在正常KC培养上清中高表达,10个点在热损伤后KC培养上清中高表达。(3)经质朴分析、数据库搜索成功鉴定了16个差异蛋白质点,包括10种蛋白。热损伤后表达下调的蛋白质点有：alpha-enolase,actin cytoplasmic2,peroxiredoxin-4,phosphoglycerate mutase 1,G protein-regulated inducer of neurite outgrowthl；表达上调的蛋白质点有：purine nucleoside phosphorylase,tumor necrosis factor ligand superfamily memberl0,proteasome subunit alpha type-7,UDP-glucose 6-dehydrogenase。结论：通过建立正常及热损伤KC培养上清的双向凝胶电泳图谱,发现了两者间存在一些差异表达的蛋白,为进一步从中优选调控组织损伤修复的主要作用分子,明晰创面修复过程中修复细胞间的调控机理提供了科学数据。
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