【摘 要】
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目的：探讨(前)脂肪细胞上非神经元型胆碱能系统是否存在及初步揭示烟碱样胆碱能受体α7对前脂肪细胞功能的影响。方法：以体外培养的3T3-L1前脂肪细胞为研究对象，先采用免疫组化(SP法)和蛋白质免疫印迹技术分别检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中乙酰胆碱酯酶(acetylcholincsterasc，AChE)、胆碱乙酰转移酶(cholineacetyltransfcrase，ChAT)和烟碱样乙酰胆碱胆
【机 构】
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中科技大学同济医学院附属同济医院儿科 湖北武汉430030 中科技大学同济医学院附属同济医院儿科
【出 处】
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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会
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目的：探讨(前)脂肪细胞上非神经元型胆碱能系统是否存在及初步揭示烟碱样胆碱能受体α7对前脂肪细胞功能的影响。
方法：以体外培养的3T3-L1前脂肪细胞为研究对象，先采用免疫组化(SP法)和蛋白质免疫印迹技术分别检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中乙酰胆碱酯酶(acetylcholincsterasc，AChE)、胆碱乙酰转移酶(cholineacetyltransfcrase，ChAT)和烟碱样乙酰胆碱胆碱受体α7(acetylcholine receptor，AChRα7)三种胆碱能系统主要组分的蛋白表达。另将前脂肪细胞分为给予广谱烟碱样乙酰胆碱受体激动剂尼古丁、特异性烟碱样乙酰胆碱胆碱受体α7激动剂氯化胆碱及特异性烟碱样乙酰胆碱胆碱受体α7拮抗剂甲基牛扁亭碱干预12h、24h、36h，并设立相应处理时间的空白对照组，应用逆转录聚合酶链反应检测前脂肪细胞脂联素(adiponectin)mRNA表达情况。
结果：①免疫组化染色可见前脂肪细胞中AChE、ChAT及AChRα7均有阳性表达；蛋白免疫印迹检测则进一步半定量地证实了前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AChE、ChAT及AChRα7的蛋白表达；②加入不同剂量的尼古丁和氯化胆碱，前脂肪细胞中adiponectinmRNA表达与对应空白对照组相比均不同程度地升高，其中12h处理组随浓度的升高adiponectin mRNA升高越显著，两种激动剂以氯化胆碱作用更明显。③拮抗剂甲基牛扁亭碱则时间和剂量依赖性抑制前脂肪细胞adiponectin mRNA表达，且与对应空白对照组相比存在显著性统计学差异。
结论：前脂肪细胞与成熟脂肪细胞中均存在有独立的胆碱能体系，其中AChRα7很可能在调节脂肪细胞因子分泌及肥胖相关的病理生理过程中发挥重要作用。
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