【摘 要】
：
本文旨在从基因水平上探究WNT信号通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用机制,为完善ESCs体外向雄性生殖细胞诱导分化体系提供依据.本研究通过构建靶向WNT信号通路上的关键基因Wnt5a的慢病毒干扰载体和过表达载体用于体内和体外实验.取新鲜受精鸡胚,尖端注射Wnt5a-shRNA慢病毒,石蜡封口,正常孵化;同时取培养至2代的ESCs,在RA诱导的基础上侵染Wnt5a-shRNA慢病毒载体.同时通过细
【机 构】
：
扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物繁育与分子设计重点实验室,江苏扬州225009
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会家禽学分会第十八次全国家禽学术讨论会
论文部分内容阅读
本文旨在从基因水平上探究WNT信号通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用机制,为完善ESCs体外向雄性生殖细胞诱导分化体系提供依据.本研究通过构建靶向WNT信号通路上的关键基因Wnt5a的慢病毒干扰载体和过表达载体用于体内和体外实验.取新鲜受精鸡胚,尖端注射Wnt5a-shRNA慢病毒,石蜡封口,正常孵化;同时取培养至2代的ESCs,在RA诱导的基础上侵染Wnt5a-shRNA慢病毒载体.同时通过细胞组织形态学观察、RT-qPCR、间接免疫荧光、流式细胞术、石蜡切片等方法进行检测,以研究WNT信号通路对鸡雄性生殖细胞分化的调控作用.在体内外实验中通过干扰Wnt5a信号分子的表达,从而显著下调WNT信号通路中地下游基因(AXin2、PKC和β-catenin),最终抑制鸡胚胎干细胞(ESCs)向雄性生殖细胞分化.WNT信号通路通过Wnt5a与下游分子共同调控信号传递,最终能够正向调控鸡ESCs向雄性生殖细胞分化过程.
其他文献
旨在剖析蛋鸡蛋白高度遗传参数动态变化规律.采集白来航鸡×绿壳蛋鸡资源群体亲代、F1代、F2代蛋壳厚度数据18624条,利用WOMBAT软件以多性状动物模型分析表型方差组分.结果表明:批次和亲代品种效应对统计蛋白高度有着重要影响,将其列入固定效应;资源群体蛋白高度遗传力为0.17～0.30;不同周龄蛋白高度表型相关系数为0.22～0.43,遗传相关系数为0.58～0.97,相邻周龄遗传相关系数较高.
本试验以13胚龄的卷羽麒麟鸡和怀乡鸡鸡胚背部皮肤组织作为研究对象,通过荧光定量的方法,检测麒麟鸡鸡胚背部组织和怀乡鸡鸡胚背部组织中gga-miR-1798-3p和Hsp70的表达量,结果发现gga-miR-1798-3p基因在麒麟鸡中的表达量明显低于怀乡鸡的表达量,而Hsp70基因在麒麟鸡中的表达量明显高于怀乡鸡的表达量.从而得出gga-miR-1798-3p基因和Hsp70基因呈负相关关系,由此
本研究利用峪口白壳蛋鸡3个纯系连续4个世代的系谱资料和个体性能测定数据,采用单性状动物模型BLUP和约束性最大似然法(REML)估计了6个主要性状的遗传力和个体加性遗传效应(育种.值),并分析了各性状的世代间遗传趋势.结果表明:3个系各性状的遗传力基本一致,产蛋数属于低遗传力性状,开产日龄和体重属于高遗传力性状,蛋重遗传力属于中等偏上.经过几个世代的连续选育,产蛋数的平均育种值在不断提高,蛋重和体
为了研究珍珠鸡肌肉品质,本试验通过对17周龄珍珠鸡6只(公母各半)的胸肌和腿肌中17种氨基酸、37种脂肪酸及14种矿物元素含量进行了检测分析.结果表明:①母鸡的肌肉风味要优于公鸡,胸肌风味要优于腿肌;②胸肌的蛋白质质量优于腿肌,母鸡肌肉优于公鸡;③肌肉不饱和脂肪酸含量胸肌高于腿肌,公鸡高于母鸡.
细菌感染诱导的肠道疾病给养禽业带来巨大经济损失,Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)作为天然免疫的模式识别受体,在抵抗病原物质入侵中发挥至关重要的作用.因此,为了探讨TLRs在沙门氏菌感染诱导的雏鸡肠道疾病中的作用,本研究以1日龄科宝肉鸡为试验动物,采用Salmonella lipo-polysaccharides(LPS)或生理盐水进行刺激,运用qPCR技术检测刺激
拷贝数变异是个体间基因组序列差异及生物体遗传变异的重要来源,对表型变异的影响至关重要.本研究以杏花鸡与隐性白洛克鸡全同胞家系F2代资源群(554个个体)为研究材料,探究了GGA2上一个CNV(片段缺失)的多样性与鸡生长性状的关系.统计发现,该CNV的多样性和鸡28、49、56、63、77、84日龄体重显著相关(P＜0.05),和鸡70天龄体重极显著相关(P＜0.01).表明GGA2上该DNA片段的
取对数期末的DF-1细胞,通过手工拉针连接橡皮管制备的单细胞分离装置,于倒置显微镜下收集DF-1单细胞.收集的单细胞培养于同源条件培养基中,形成单细胞克隆之后传代并建立DF-1单克隆细胞系;采用连续细胞计数绘制DF-1单克隆细胞系生长曲线;秋水仙素处理后吉姆萨染色进行染色体核型分析;软琼脂克隆法检测致瘤性.克隆形成试验结果表明:条件培养基组单细胞克隆形成率为2.93％±0.23与普通培养基组的0.
本研究旨在探索睾酮所在的甾类激素合成通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用机制,为构建鸡雄性生殖细胞分化调控网络提供理论依据.本实验利用睾酮对鸡胚胎干细胞(ESCs)进行诱导实验;再通过对睾酮所在甾类激素合成信号通路中关键基因HSD3B2进行干扰或过表达,阻断或增强信号传导后进行体内外的qRT-PCR、流式细胞分析、间接免疫荧光检测生殖标记基因的表达.结果表明,睾酮作为甾类激素合成信号通路的产物能诱
FMO3基因俗称鱼腥味基因,该基因突变可能导致鱼腥味综合征.本实验旨在采用PCR-RFLP方法研究FM03基因T329S突变位点在拉萨白鸡群体中基因及基因型频率分布情况,为提高该品系的蛋品质提供数据基础.实验结果显示:拉萨白鸡群体中,AA、AT和TT(鱼腥味综合症易感基因型)基因型频率分别为90.48％、9.52％和O,A和T的基因频率分别为95.24％、4.76％.该多态位点处于Hardy-We
精原干细胞在精子发生机理研究、转基因动物建立及多潜能干细胞制备等方面有广阔的应用前景,但是其具体的发生机制尚不清楚.为了探究MAPK/ERK信号通路在精原干细胞形成过程中的功能,以FGF8作为靶基因,对FGF8进行过表达和干扰处理,通过qRT-PCR、细胞免疫化学和流式细胞分析检测PGCs和SSCs的标记基因的表达以及生成效率.研究发现干扰FGF8能抑制MAPK/ERK信号转导途径的活性,上调PG