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【目的】中药常山（Dichroa febrifuga Lour.）的生药根中总生物碱含量约为0.1%,主要有效活性单体包括常山乙素（即常山碱或常山碱乙,β-dichroine,dichroine B,febrifugine）和常山甲素（即异常山碱或常山碱甲,α-dichroine,dichroineA,isofebrifugine）。对比二者的波谱数据,两者结构相似,均为喹唑酮类生物碱,分子式均为C16H19O3N3,但链上的基团和构型存在差异,两者为互变异构体,但总含量保持不变。鉴于常山原药材或饮片中常山乙素和常山甲素的含量很低,提取分离困难,且不同产地的常山药材及其饮片中两者含量存在很大差异,直接关系到其临床用药的安全性和有效性,为此有必要建立合适的方法同时检测常山乙素和常山甲素的含量,才可以准确反应常山药材或常山提取物中常山总生物碱的含量。常山为有毒中药材,迄今《中国药典》2015版仍未收录常山总生物碱的高效液相检测方法,导致常山药材及其提取物的质量控制缺乏高效、灵敏的检测方法,给中药常山散的临床安全使用带来不确定因素。因此,本试验通过比较3种不同高效液相和色谱柱,对常山散中常山乙素和常山甲素含量检测结果的影响,考察试验所用液相色谱条件的系统适用性,旨在为今后制定常山散的国家质量标准、指导临床科学用药及申报新药提供数据基础及理论支撑。【方法】选择三种不同类型的液相和色谱柱,包括安捷伦1290型液相色谱仪(配套SB-C18色谱柱)、沃特斯2695型液相色谱仪(配套XTerra@MS C18色谱柱)和岛津SPD-10A型液相色谱仪(配套Amethyst C18-H色谱柱);流动相:乙腈-0.3%冰醋酸（30:70）,三乙胺调pH值至5.2-6.2,流速:1.0 mL/min,检测波长:265 nm,柱温:25℃,进样量:10μL。【结果】试验所用高效液相色谱条件,对于以上三种液相和色谱柱的系统适用性较好,三批常山散中常山乙素和常山甲素的含量基本一致,常山乙素和常山甲素峰型较好,与周围杂质分离度较好。三批常山散中常山乙素和常山甲素的总含量均在1.5 mg/g左右。所用高效液相检测条件精密度和重复性较好,具有前处理简便、稳定性好、分析时间短等特点。【结论及重要数据】以上色谱条件可以用来检测常山原药材及其提取物中常山总生物碱的含量,适用于中药常山散及其相关制剂的质量控制。常山散中常山乙素和常山甲素与周围杂质的分离度未达到预期效果,常山甲素峰型有些偏宽,理论塔板数不够5000,后期将继续通过调整流动相比例、pH值、柱温等可调节因素,以使常山乙素和常山甲素达到理想的分离效果,试验结果可为制定常山散国家质量标准及指导临床用药奠定基础。