犬隐孢子虫病流行病学调查及其分子遗传特征分析

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为了解犬隐孢子虫流行情况、传播动态及其人兽共患风险评估,采用饱和蔗糖溶液漂浮法对河南省郑州地区宠物犬和四川成都、简阳和雅安地区犬进行调查。于2006年6月至2009年5月在郑州地区共采集犬新鲜粪便样本770份,29份镜检呈阳性,总感染率为3.8%,其中宠物医院犬、宠物犬场犬和宠物市场感染率分别为1.0%、7.0%和4.5%(p<0.01);隐孢子虫感染率随犬年龄增长呈逐渐递减趋势(P<0.01);雌雄犬感染率分别为3.4%和4.2%(p>0.05)。于2009年11月至2010年7月在四川部分地区共采集犬新鲜粪便样本494份,21份镜检呈阳性,总感染率为4.3%,其中成都、简阳和雅安地区犬感染率分别为1.4%、8.0%和6.5%(p<0.01);以365d以上犬感染率最高,为6.3%,0-90d、91-180d和181-365d感染率分别为3.5%、2.5%和1.9%(p<0.01)。基于18S rRNA基因位点对50个隐孢子虫阳性样本进行PCR扩增,对其产物分别用SspⅠ酶和VspⅠ酶进行RFLP分析,结果显示均为犬隐孢子虫(Cryptosporidium canis),选取不同采样点的20份阳性样本进行测序,在NCBI核酸序列数据库搜索同源序列,利用Clustal X1.81、Phylip3.67和DNAstar5.0生物学软件对序列进行比对、同源性分析及构建分子进化树,发现20个阳性样本均为C.anis。本研究结果表明,不同地区和年龄段犬隐孢子虫情况存在差异,感染虫种均为C.anis,对人类健康具有潜在威胁性,为进一步开展犬隐孢子虫分子流行病学和人兽共患传播途径的研究提供了参考数据。
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