重组腺病毒介导KDRP-CD/TK基因对LOVO细胞增殖活性和细胞周期的影响

来源 :中国医师协会外科医师分会成立大会暨第十二届全国普通外科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:stbruce
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目的探讨腺病毒介导KDR启动子驱动的融合基冈体系对人大肠癌细胞LOVO的增殖活性及细胞周期的影响。 方法:以重组腺病毒AdEasy-KDR-CDglyTK体外感染表达KDR的LOVO细胞株和对照组不表达KDR的LS174T细胞株。并给予不同浓度的前药5-FC和/或GCV,观察该体系对LOVO细胞的杀伤效应及其旁观者效应;并以流式细胞仪检测细胞周期的变化,电镜观察细胞的病变。 结果:重组腺病毒对LOVO细胞及对照组LS174T细胞的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的递增而增加,当MOI为200时,所有细胞株均达约100%感染。以MOI为100的重组体分别感染各细胞株表现出对前药的不同敏感性:表达KDR的LOVO细胞对前药的具有较高的敏感性,与前者相比,不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(P均<0.001)。融合基因的疗效优于任一单自杀基因(P均<0.001)。将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同混合培养,观察到该体系明显的旁观者效应。 流式细胞术检测表明该体系抑制LOVO细胞DNA的合成,表现为S期阻止。同时,电镜下可见LOVO有凋亡和坏死改变。 结论:KDR基因启动子可调控融合基因体系选择性杀伤人大肠癌LOVO细胞,其机制与细胞周期阻滞、凋亡及坏死有关。
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