【摘 要】
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目的：研究聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体材料对胎儿肝干细胞粘附及增殖的影响,寻找胎儿肝干细胞新的载体材料.方法：采用改进的两步胶原酶灌注消化法加percoll液不连续密度梯度离心
【机 构】
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天津市第三中心医院,天津市人工细胞重点实验室,天津300170
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目的：研究聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体材料对胎儿肝干细胞粘附及增殖的影响,寻找胎儿肝干细胞新的载体材料.方法：采用改进的两步胶原酶灌注消化法加percoll液不连续密度梯度离心的方法,分离胎儿肝干细胞.选取胎儿肝干细胞的传代细胞,种植于聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体材料上.倒置显微镜下观察细胞的粘附和生长状况;计算细胞贴壁率;MTT法检测各组细胞的吸光度值(OD值);收集载体支架上细胞并计数.取细胞载体进行组织学切片,HE染色光镜下观察.在细胞培养第7天进行免疫荧光化学染色和流式细胞仪检测.结果:聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体能促进肝干细胞在材料内粘附并保持其在机体内的形态.载体材料内的肝干细胞功能活跃.在材料表面和三维空间内部培养的肝干细胞均能持续增殖.结论:经过连续40天共同培养聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体对干细胞无毒性,人胎儿肝干细胞可以很好的贴附于聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体支架上,细胞增殖活力良好,标志物持续表达,培养7天得到的细胞数量增多19.7％.聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体能使肝干细胞增殖,有可能作为肝干细胞的载体应用于肝脏组织工程.
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