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目的：旨在建立奶牛瘤胃TVA氢化细菌体外富集和分离培养的优化条件。方法：在厌氧培养基中添加不同浓度TVA (0, 30, 40, 50, 60 μ/mL )，接种瘤胃微生物后进行连续培养，每隔4h采集培养物，用于测定TVA含量及培养液OD值。另外，在厌氧培养基中添加TVA，使其终浓度为50 μg/mL，传代培养6代收集每代富集培养物，利用PCR-DGGE分析TVA氢化细菌种群的变化，并选取DGGE差异条带进行16S rDNA测序分析。结论：体外分离培养瘤胃TVA氢化菌最适TVA添加量为50 μg/mL，连续培养12 h，最佳传代数为第4代。在下一步TVA氢化菌的分离培养中，需通过菌种鉴定和微生物遗传型鉴定进一步确定其生物学功能。