【摘 要】
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本研究以曼地亚红豆杉为实验材料，首先克隆出目的基因，将目的基因片段插入pCambia1304载体的T-DNA区域，最后将含有外源基因的pCambia1304载体导入农杆菌GV3101中。选取处于对数生长期的的红豆杉细胞，将活化好的带有外源目的基因的农杆菌加入红豆杉细胞悬浮培养液中.共培养3天后，将细胞转移至含头抱霉素的固体培养基上。室温条件下生长两周后再将细胞转移至含头抱霉素和潮霉素的培养基上。应
【机 构】
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中国医学科学院-中国协和医科大学药用植物研究所北京100094国家林业局林木培育重点实验室北京100091
【出 处】
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2009年全国植物分子育种学术研讨会
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本研究以曼地亚红豆杉为实验材料，首先克隆出目的基因，将目的基因片段插入pCambia1304载体的T-DNA区域，最后将含有外源基因的pCambia1304载体导入农杆菌GV3101中。选取处于对数生长期的的红豆杉细胞，将活化好的带有外源目的基因的农杆菌加入红豆杉细胞悬浮培养液中.共培养3天后，将细胞转移至含头抱霉素的固体培养基上。室温条件下生长两周后再将细胞转移至含头抱霉素和潮霉素的培养基上。应用GUS组织化学染色，荧光蛋白观察及Southern技术对转基因细胞进行了鉴定，检测结果表明证实转基因实验获得成功。另外，采用HPLC技术对转基因细胞系的三种紫杉烷成分也进行了测定。
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