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目的 :自身免疫性肝炎AIH是自身免疫系统紊乱,导致免疫细胞直接或者间接攻击肝实质细胞,最终造成肝细胞损伤的炎症疾病;目前其致病机理仍然不清楚,主要认为是跟自身基因的倾向性以及外界环境的诱因相关。AIH的治疗手段主要是免疫抑制以及晚期的肝脏移植,但是在免疫抑制治疗过程中有15~20%的病人对现有的药物治疗是不敏感的,并且免疫抑制治疗伴随着许多副作用。因此,对于疾病发生发展的机理研究以及药物开发,建立新的动物模型就非常迫切。方法 :本实验室从茶树菇中提取了一种新的半乳糖凝集素AAL,C57小鼠尾静脉注射2.5mg/kg的AAL,9h后能够观察到小鼠明显的肝脏损伤,与经典自身免疫性肝炎小鼠模型(Con A)类似,都是急性的小鼠肝炎模型,但是后期实验发现AAL诱导小鼠的肝炎与Con A机理完全不同。结果 :一、我们摸索了AAL诱导肝炎的时间和浓度梯度,发现在AAL2.5mg/kg处理小鼠9h后,小鼠肝脏有明显的肝损伤。二、构建AAL的糖结合区域突变体AAL-63,以及原核表达的r AAL,发现r AAL仍然能够诱导肝炎而无糖结合活性的突变体AAL-63不能诱导肝炎,同时乳糖封闭AAL后也不能诱导肝炎,说明AAL诱导肝炎与其糖结合活性有关。三、AAL和Con A处理裸鼠后,都不能诱导肝炎,用免疫抑制剂Cs A处理小鼠后,Cs A能够抑制Con A诱导的肝损伤,不能抑制AAL诱导的肝损伤,说明AAL诱导肝炎模型与临床上对于免疫抑制剂治疗不敏感的病人发病机理可能相似。四、分别用CD4和CD8单克隆抗体封闭小鼠后,CD4抗体能够抑制Con A诱导的肝炎,而CD8抗体只能部分抑制Con A诱导的肝炎;但是对于AAL诱导的肝炎都有加重效果,说明Treg在AAL模型中具有重要作用。五、AAL诱导肝炎过程中,检测了不同时间段肝脏淋巴细胞的变化,发现AAL诱导的肝炎NKT细胞具有重要促炎作用;同时也检测了6h时肝脏转录组,通过q PCR验证,发现大量细胞因子和趋化因子表达。六、用醋酸格拉替雷GA处理小鼠两周后,发现GA不能抑制Con A诱导的肝炎,但能抑制AAL诱导的肝炎(需要再次验证)。结论 :我们发现一种新凝集素能够诱导小鼠自身免疫性肝炎,其发病机理可能与临床上对免疫抑制治疗不敏感的病人相似;与经典的AIH小鼠模型Con A的发病机理不一样,AAL模型与Treg和NKT细胞相关,而GA对于这类自身免疫性肝炎可能有治疗效果。