目的:本研究主要针对甲型血友病及乙型血友病的基因诊断、产前诊断建立诊断方法体系以及探索其植入前诊断。方法:基因诊断:本课题组对甲型血友病患者和可疑携带者先行第22内含子倒位突变检测,主要采用本课题组改良的I-PCR方法,并结合LD-PCR方法保证其准确性;第22内含子倒位阴性者行第1内含子倒位突变检测,主要采用双管多重PCR的方法;利用变性高效液相色谱技术(DHPLC)筛查第22内含子和第1内含子倒位突变阴性者FⅧ基因26个外显子、内含子-外显子连接区、promoter区和5’、3’端非翻译区突变,发现异常者测序;要求测序者行FⅧ基因26个外显子、内含子-外显子连接区、promoter区和5’、3’端非翻译区全测序;对未发现突变又符合连锁分析条件的家系行连锁分析等方法提高HA的基因诊断及产前基因诊断率。对乙型血友病患者和可疑携带者则采用F9基因全外显子测序技术结合DHPLC技术。产前诊断:要求做产前诊断的家系必须先对其进行基因诊断,而后采集羊水或脐静血并根据基因诊断的结果进行针对性检测。采用STR技术排除母亲DNA的污染,提高产前诊断的准确性。植入前诊断:本研究通过对"多重置换扩增技术(MDA)"扩增卵裂球期单个细胞获得的DNA进行FⅧ基因全外显子测序探索HA植入前诊断的方法。联合长片段PCR技术和遗传连锁分析的方法来对第22内含子倒位突变携带者进行植入前遗传学诊断,孕妇现已妊娠15周,进一步跟踪正进行中。结果:本课题组先后成功为57个HA家系进行基因诊断并检测出5个新突变,其中19例进行产前诊断;成功为6个HB家系进行基因诊断,其中7例进行产前诊断。产前诊断结果与出生后随访相符。