【摘 要】
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目的 探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对肝癌细胞株HepG2的杀伤作用,分析其抑瘤作用的最佳效靶比及最佳治疗时间.方法 采集肝胆病院40例肝细胞肝癌(HCC)患者静脉外周血,加入淋巴细胞分离液(Ficoll),采用密度梯度离心法分离单个核细胞(PBMC),调整细胞密度(1×108/L)后,移入经CD3单抗包被的培养瓶,悬于ALy505S培养液(IL-2 700 IU/mL)中,另加入1％～5％
【机 构】
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天津市第三中心医院,天津市人工细胞重点实验室,天津市肝胆疾病研究所,天津 300170
【出 处】
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天津市生物医学工程学会第三十三届学术年会
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目的 探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对肝癌细胞株HepG2的杀伤作用,分析其抑瘤作用的最佳效靶比及最佳治疗时间.方法 采集肝胆病院40例肝细胞肝癌(HCC)患者静脉外周血,加入淋巴细胞分离液(Ficoll),采用密度梯度离心法分离单个核细胞(PBMC),调整细胞密度(1×108/L)后,移入经CD3单抗包被的培养瓶,悬于ALy505S培养液(IL-2 700 IU/mL)中,另加入1％～5％的自体血浆(血浆经过热处理,离心移除沉淀,取清澈血浆),置于37℃、体积分数5％ C02培养箱中孵育5d后,转移至培养袋中扩大培养,培养体系为每袋1 000 mL,2袋/每例患者,调整ALy505S培养液中IL-2浓度为175 IU/mL,经14d诱导为成熟的CIK细胞.分别取第14天、第15天和第18天的CIK细胞作为效应细胞,肝癌细胞株HepG2作为靶细胞,于96孔板中共培养24 h,效靶比分别为2.5∶1.0、5.0∶1.0、10.0∶1.0、20.0∶1.0,同时设对照孔,每孔设3个复孔;采用MTT法在490 nm处检测吸光度值(OD),计算CIK细胞对HepG2细胞的杀伤率,计算公式为{1-(共培养组OD值-效应组OD值)/靶细胞组OD值}×100％.
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