【摘 要】
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构巢曲霉Aspergillus nidulans alc基因开关是利用乙醇灵敏、精确和安全地调控基因表达系统,广泛用于丝状真菌和植物基因的调节表达,但在担子菌中尚未见报道.从糙皮侧耳Pleur
【机 构】
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河南农业大学生命科学学院,农业部农业微生物酶工程重点实验室,郑州 450002
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构巢曲霉Aspergillus nidulans alc基因开关是利用乙醇灵敏、精确和安全地调控基因表达系统,广泛用于丝状真菌和植物基因的调节表达,但在担子菌中尚未见报道.从糙皮侧耳Pleurotus ostreatus PC15 v2.0基因组数据库中电子克隆得到其假拟乙醇脱氢酶基因(alcA)及其上游序列,该基因上游1317bp序列中含有1个正向和2个反向AlcR蛋白的特异性结合位点序列.将构建的含有alcA基因启动子控制绿色荧光蛋白基因表达的质粒pEGFP-C 1-PalcA转入糙皮侧耳天达300中,转化子在含有葡萄糖的培养基中没有绿色荧光蛋白表达,在含有乙醇的培养基中则有绿色荧光蛋白表达.结果表明,糙皮侧耳利用乙醇的代谢调控机制与构巢曲霉相似,仅用alcA基因启动子替代目的基因的启动子即可有效调控基因的表达.
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