目的 探讨层粘连蛋白(Laminin,LN)与脑微血管内皮细胞(Rat cerebral microvascular endothelial cells,RCMECs)对正常及缺氧条件下培养的神经干细胞(Neural stem cells,NSCs) 分化及VEGF、TGF-β表达的影响。方法 (1)采用胶原酶消化、贴壁细胞培养方法分离培养RCMECs,用光学显微镜及免疫细胞化学检测进行鉴定；(2)采用机械吹打、无血清完全培养基悬浮培养方法分离培养NSCs,用光学显微镜及免疫细胞化学方法鉴定NSCs及其分化后的细胞类型；(3)通过95％N2、5％CO2比率的缺氧气体培养NSCs 6h后建立缺氧损伤NSCs模型,采用MTT比色法、LDH检测缺氧损伤前、后细胞活性的变化,并采用免疫细胞化学方法比较缺氧损伤前、后神经元分化的情况；(4)实验分组：常氧组(NSCs+NSCs完全培养基)、缺氧组(缺氧NSCs+NSCs完全培养基)、常氧+LN+ RCMECs组(NSCs+NSCs完全培养基+LN+RCMECs)、缺氧+LN+ RCMECs组(缺氧NSCs+NSCs完全培养基+LN+ RCMECs)；(5)分别于6h、1d、3d、7d、14d等时间点用免疫细胞化学方法比较NSCs的分化情况及观察VEGF、TGF-β的表达。