【摘 要】
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目的：探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV) RNA复制中的作用. [方法]DENV感染HepG2细胞后,在不同时间点(2hr、24hr、36hr、48hr)收集细胞和提取总mRNA,实时定量PCR (RT-qPCR
【机 构】
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第四军医大学微生物学教研室,西安,710032
【出 处】
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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
论文部分内容阅读
目的：探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV) RNA复制中的作用. [方法]DENV感染HepG2细胞后,在不同时间点(2hr、24hr、36hr、48hr)收集细胞和提取总mRNA,实时定量PCR (RT-qPCR)分析lsm-1表达水平；将lsm-1的siRNA和非特异对照siRNA两次转染HepG2细胞后感染DENV-2,24hr后收集细胞,提取总mRNA,RT-qPCR分析lsm-1表达水平与病毒RNA表达水平；利用LSm-1抗体与dsRNA抗体对DENV感染细胞进行免疫荧光染色,激光共聚焦分析LSm-1与dsRNA共定位情况. [结果]与2hr时相比,随着时间的推移,DENV-2RNA和LSm1 RNA水平逐渐升高；与对照组siNC相比,siLSm1组LSm1 RNA水平明显降低,沉默效率达78.2％；与对照组siNC相比,siLSm1组DENV RNA含量降低35.6％；LSm1-7复合体在DENV感染HepG2细胞后募集到核周围,与DENV dsRNA共定位. [结论]LSm1-7复合体可能作为DENV复制复合物的组成部分,正调控DENVRNA的复制.
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