桃SSR反应体系的建立

来源 :吉林省第五届科学技术学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yxh0710
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  针对桃树树种——大久保桃,进行了其基因组DNA的提取,探讨了SSR反应体系中各组分浓度对扩增反应产物的影响.结果表明,采用的提取方法所得的基因组DNA纯度好、片段完整,无明显降解;在25 L体系中的适宜浓度分别为:94℃预变性5min; 94℃变性1min、53℃退火30 s、72℃延伸1min,35个循环;最后72℃延伸5min.经正交试验设计,建立了桃SSR-PCR反应体系,即1×PCR Buffer、Taq DNA聚合酶2U、MgCl2 2mmol/L、模板DNA 80ng、dNTPs 240~360μmol/L、每个特异性引物各0.4μmol/L,余下体积用已灭菌的去离子水补足至25μL.
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