羧甲基壳聚糖对体外培养大鼠雪旺细胞c-fos、c-jun表达及细胞增殖周期的影响

来源 :中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cx77287728cx
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  目的 探讨羧甲基壳聚糖(Carboxymethylated chitosan,CMCS)对雪旺细胞(Schwann cells,SCs)增殖及c-fos、c-jun及Cyclin E表达的影响.方法 取3~5日龄SPF级SD大鼠20只,雌雄不限,体重25~30g,取双侧坐骨神经体外培养SCs,经S-100免疫荧光标记鉴定.取处于对数生长期的第2代SCs,应用噻唑蓝(MTT)比色法及BrdU染色法检测不同浓度CMCS对SCs增殖的影响.将SCs分为4组,加入CMCS调整终浓度为50(B组)、100(C组)、200μg/mL(D组),对照组(A组)加入等量PBS;逆转录PCR检测SCs内c-fos、c-jun及Cyclin E基因的表达;Western blot法检测c-fos、c-jun及Cyclin E蛋白表达的改变.结果 S-100免疫荧光标记鉴定示细胞阳性率达90%以上,MTT及BrdU染色结果均表明CMCS在50~200μg/mL浓度范围内可促进SCs增殖(P<0.05),且随着CMCS浓度的增殖而增加.RT-PCR和Western blot检测均显示,B、C、D组c-foc、c-jun及Cylcin E mRNA和蛋白表达均显著高于A组(P<0.05);其中D组作用最明显.结论 CMCS可以促进SCs增殖并促进增殖周期相关基因c-fos、c-jun及Cylcin E表达.
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