【摘 要】
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目的：应用分子克隆技术,建立CYP1A2基因沉默和CYP1A2基因高表达细胞株,研究CYP1A2基因对三氯乙烯(TCE)毒性的影响.方法：将TCE分别染毒L02肝细胞、CYP1A2基因沉默细胞和CYP1A2基因高表达细胞,TCE染毒剂量为0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mmol/L,DMSO作为溶剂对照,染毒12h,观察凋亡基因(Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8
【机 构】
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深圳市疾病预防控制中心毒理学重点实验室
【出 处】
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第六届中国毒理学会免疫毒理专业委员会换届及学术会议
论文部分内容阅读
目的：应用分子克隆技术,建立CYP1A2基因沉默和CYP1A2基因高表达细胞株,研究CYP1A2基因对三氯乙烯(TCE)毒性的影响.方法：将TCE分别染毒L02肝细胞、CYP1A2基因沉默细胞和CYP1A2基因高表达细胞,TCE染毒剂量为0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mmol/L,DMSO作为溶剂对照,染毒12h,观察凋亡基因(Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)和癌基因(c-fos、c-myc、k-ras、p53)表达水平.结果：TCE染毒CYP1A2基因沉默细胞后,Bcl-2的mRNA表达水平显著高于对照组(P＜0.01),TCE部分剂量组凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和癌基因c-fos、c-myc表达水平低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).TCE染毒CYP1A2基因高表达细胞后,Bcl-2的mRNA表达水平比对照组显著下降,Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA表达水平比对照组显著升高(P＜0.01)；CYP1A2高表达细胞中癌基因c-fos、c-myc、k-ras表达水平显著高于对照组(P＜0.01),p53表达水平显著低于对照组(P＜0.01).结论：TCE在体内代谢与CYP1A2存在密切关系,沉默CYP1A2基因可以减少TCE在肝细胞内代谢活化,导致TCE对凋亡基因和癌基因表达水平下降；TCE在CYP1A2基因高表达细胞中表现出对凋亡基因和癌基因具有促进表达作用.
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