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目的：探讨建立无血清无动物源性培养基(VP-SFM)培养非洲绿猴肾(African Monkey KidenyCell,Vero)细胞的工艺,以期为生产中采用无血清培养基培养Vero细胞及病毒性疫苗提供一定的实验依据.方法：采用VP-SFM适应培养Vero细胞,建立无血清无动物源性Vero细胞库；对细胞库进行常规检定；绘制VP-SFM培养Vero细胞生长曲线；对无血清培养Vero细胞进行传代稳定性研究：比较140代、150代、160代Vero细胞在VP-SFM培养的1l和Cd；比较142代、147代、153代Vero细胞在VP-SFM培养的狂犬病毒滴度；比较无血清与含血清培养140代、150代、160代Vero细胞的队和Cd；分别在250 mL spinner flask中加入2 g/L cytodex I、在3L搅拌式生物反应器中加入3 g/L cytodex I来培养Vero细胞,观察无血清、微载体搅拌培养Vero细胞贴壁和生长情况.结果：建立无血清无动物源性Vero细胞库,细胞密度为4 ×106cells/mL,冻存前细胞活率为100％,复苏后细胞平均活率为94.20±3.95％,无菌检查和支原体检查合格；细胞在VP-SFM中复苏传代后生长良好,经过1天潜伏期后,第2天进入对数生长期,第8天进入平台期,第12天达最大细胞密度20.5 × l05 cell/mL,并维持至第14天,活细胞数开始下降,最大比生长速率为0.025 4 h-1.无血清培养Vero传代稳定性研究显示：140代、150代、160代间Vero细胞在VP-SFM培养的μ和Cd无显著性差异(P＞0.05)；142代、147代、153代Vero细胞在VP-SFM培养狂犬病毒的滴度均无显著性差异(P＞0.05)；140代、150代、160代Vero细胞在无血清和含血清培养基的μ和Cd 比较均无显著性差异(P＞0.05).在3L生物反应器微载体系统中无血清培养Vero细胞,细胞贴壁、生长良好.结论：初步建立无血清、无动物源性物质的Vero细胞库；采用方瓶静置培养或微载体搅拌培养均生长良好；Vero细胞传代稳定性良好；无血清培养结果不差于传统的含血清培养.