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辅酶Q10是一种强烈的抗氧化剂,具有延缓衰老、治疗帕金森综合症以及保护心脏等功效,广泛用于化妆品和保健品市场.本文利用DNA重组技术对辅酶Q10产生菌Rhodobacter sphaeroides进行分子育种改造.首先克隆得到R.sphaeroides 2.4.1的crtB基因上下游各2.5kb左右的同源交换臂crtBup和crtBdw,以及Escherichia coli DH5α的ubiC-ubiA连锁基因.利用pSUP202自杀性载体，成功的构建出了带有同源双臂、ubiC-ubiA基因和壮观霉素抗性基因的敲除载体pCIM22。利用接合转移技术，将pCIM22导入R.sphaeroides 2.4.1,通过松弛培养筛选双交换，成功获得带有外源ubic-ubia基因和Spectinomycin抗性的突变株R.sphaeroides Dana。通过R.sphaeroides Dana的RT-PCR实验等方法，证实了外源基因ubiC-ubiA在R.sphaeroides Dana中的成功转录。发酵24h后，利用HPLC测定R.sphaeroides 2.4.1和R.sphaeroides Dana的辅酶Q10产量，结果表明突变株辅酶Q10产量较出发菌株提高了75.29％。