共表达PRRSV GP5和M蛋白重组腺病毒的构建与鉴定

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tmac0000000
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本研究利用口蹄疫病毒(FMDV)2A蛋白具有自我裂解的功能,将其作为连接肽将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的GP5和M蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现两个蛋白的表达,以发挥GP5蛋白的病毒中和优势和M蛋白的细胞免疫优势作用。分别利用RT-PCR、间接免疫荧光和Western blot等方法,对获得的重组腺病毒(rAd-GP5-2A-M)进行检测,结果均证明GP5-2A-M蛋白不仅获得了正确表达,而且能自我裂解为GP5和M蛋白。上述研究表明,在GP5和M蛋白之间插入具有自我裂解功能的FMDV2A策略是切实可行的,并为PRRSV多个蛋白的共表达奠定了基础,也为其它病毒的基因工程疫苗研制提供了全新的思路。
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