【摘 要】
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以草鱼(Ctenopharyngodon idella)肝胰脏为材料,经过亲和层析和离子交换层析纯化葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD).对G6PD的pH、温度、底物Km、Vm和金属离子等部分酶学性质进行了研究.纯化所得G6PD的比活为18 u/mg,得率为19.5％,纯化倍数1066倍,相对分子量约为71.85 kDa.G6PD的最适温度为42℃.最适pH为7.5和9.0.G6-P和NADP+的K
【机 构】
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华中农业大学水产学院,武汉430070 中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室,青岛266003
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以草鱼(Ctenopharyngodon idella)肝胰脏为材料,经过亲和层析和离子交换层析纯化葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD).对G6PD的pH、温度、底物Km、Vm和金属离子等部分酶学性质进行了研究.纯化所得G6PD的比活为18 u/mg,得率为19.5％,纯化倍数1066倍,相对分子量约为71.85 kDa.G6PD的最适温度为42℃.最适pH为7.5和9.0.G6-P和NADP+的Km值分别为0.026和0.0068 mM.G6-P和NADP+的Vm值分别为2.20和2.27 μM min-1 mg protein-1.金属离子Zn+2,Al+3,Cu+2和Cd+2对G6PD的Ki值分别为0.52,1.12,0.26和4.8mM.Zn+2,Al+3和Cd+2对G6PD的抑制机理表现为竞争性类型,Cu+2是非竞争性.本研究为草鱼肝胰脏中磷酸戊糖途径(PPP)的调控,重要生物分子的合成,以及与代谢相关解毒系统的研究提供了重要信息.
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