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[期刊论文] 作者:赵方萄,史耕先, 来源:中国医学科学院学报 年份:2000
目的:观察6A8α-甘露糖苷酶表达对人B细胞株3D5增殖反应的影响。方法:以重组腺相关病毒颗粒为载体,将正义6A8DNA或反义6A8DNA转导入EB病毒转化的人B细胞株3D5,用单抗6A8a染色反应和ConA结合试验确认6A8α-甘露糖苷酶高表......
[期刊论文] 作者:赵方萄,史更先,李琳, 来源:中国医学科学院学报 年份:2000
[期刊论文] 作者:张澄波,马大龙,赵方萄,, 来源:首都医学院学报 年份:1989
报道了用免疫酶法从人肝细胞cDNA文库中筛选清蛋白cDNA克隆的过程。所得到的克隆用免疫学方法及内切酶水解法进行鉴定。在7个阳性克隆中,有8个cDNA克隆分子的叠加占据了整个...
[期刊论文] 作者:赵方萄,史耕先,李琳,朱立平, 来源:中国医学科学院学报 年份:2000
目的观察 6A8α-甘露糖苷酶表达对人 B细胞株 3D5增殖反应的影响。方法以重组腺相关病毒颗粒为载体,将正义 6A8 DNA或反义 6A8 DNA转导入 EB病毒转化的人 B细胞株 3D5,用单抗 6...
[期刊论文] 作者:史耕先,刘音,赵方萄,朱立平, 来源:中华微生物学和免疫学杂志 年份:2001
目的采用形态学和分子生物学方法,分析转导6A8 α-甘露糖苷酶的反义DNA导致的B细胞株BJAB死亡的性质. 方法用Giemsa染色、annexin-Ⅴ荧光染色、梯形DNA电泳以及透射电子显微镜等方法,分析细胞死亡的性质;应用Con A结合试验,检测转基因细胞6A8 α-甘露糖苷酶活性......
[期刊论文] 作者:史耕先,刘音,赵方萄,朱立平, 来源:中华微生物学和免疫学杂志 年份:2001
目的构建腺相关病毒(AAV)载体并进行鉴定,以介导真核细胞的基因传递和表达. 方法以基因重组技术构建AAV载体,用Southern杂交、狭缝杂交以及激光共聚焦显微镜等鉴定构建的AAV载体. 结果成功地获得了重组AAV表达载体pAGX(+),藉报告基因EYFP鉴定pAGX(+),见pAEYFP经......
[期刊论文] 作者:赵方萄,李璟,史耕先,刘音,朱立平, 来源:中国医学科学院学报 年份:2003
目的观察蛋白质糖基化改变对大鼠肝脏上皮细胞WB-F344表面微绒毛及在培养中生长的影响.方法 构建含正义或反义6A8 DNA的重组pAGX(+)质粒,用脂质体法将重组质粒或空载质粒转染...
[期刊论文] 作者:赵方萄,李瞡,史耕先,刘音,朱立平, 来源:中国医学科学院学报 年份:2003
目的观察蛋白质糖基化改变对大鼠肝脏上皮细胞WB-F344表面微绒毛及在培养中生长的影响.方法 构建含正义或反义6A8 DNA的重组pAGX(+)质粒,用脂质体法将重组质粒或空载质粒转染...
[期刊论文] 作者:岳玮,赵方萄,史耕先,刘音,朱立平, 来源:中国医学科学院学报 年份:2003
目的探讨6A8 α-甘露糖苷酶表达抑制对CNE-2L2细胞与层粘连蛋白的粘附及细胞表面片状伪足的影响.方法Western印迹检测6A8 α-甘露糖苷酶的表达.置细胞于层粘连蛋白(1aminin)...
[期刊论文] 作者:王壮志,李琳,史耕先,刘音,赵方萄,朱立平, 来源:中国医学科学院学报 年份:2001
目的明确6A8 cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质.方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8 cDNA,将其插入到真核表达载体pCDI,转染COS-7细胞,用酶活性检测与...
[期刊论文] 作者:李琳,王壮志,马凤蓉,史耕先,赵方萄,朱立平, 来源:中华微生物学和免疫学杂志 年份:2001
目的 制备 6A8α 甘露糖苷酶羧基端单抗并进行鉴定 ,以确定 6A8α 甘露糖苷酶在细胞的表达部位。方法 用基因重组技术构建 6A8cDNA 3′端DNA片段的重组表达载体 ,在原核细...
[期刊论文] 作者:靳玉兰,赵方萄,岳玮,史耕先,刘音,朱立平, 来源:基础医学与临床 年份:2003
探讨端粒长度与端粒酶活性在人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性行为改变前后的变化,建立研究恶性行为改变与端粒长度与端粒酶活性间关系的细胞模型.与6A8 α-甘露糖苷酶表达正常的CNE-...
[期刊论文] 作者:陈双玲,时岩,靳玉兰,刘音,赵方萄,朱立平, 来源:中国医学科学院学报 年份:2005
目的发现因转导反义6A8 cDNA致恶性生物学行为减弱的人鼻咽癌细胞CNE-2L2(AS)和野生型细胞(W)间的差异表达基因.方法用DNA微列阵方法比较AS细胞和W细胞基因表达的差异.用Nort...
[期刊论文] 作者:朱立平,王壮志,史耕先,刘音,王汛,赵方萄,, 来源:医学研究通讯 年份:2003
68Aα-甘露糖苷酶是本实验室克隆的cDNA(GenBank的登记号为AF044414)编码的一个新的人α-甘露糖苷酶[1].该cDNA长3300bp,其开放阅读框架编码1062个氨基酸的蛋白质.蛋白质的10...
[期刊论文] 作者:汪燚,刘音,马凤蓉,史耕先,赵方萄,朱立平, 来源:中华微生物学和免疫学杂志 年份:2003
目的明确gp42蛋白为分化抗原,检测它在人免疫细胞的表达. 方法用gp42蛋白免疫小鼠,制备抗gp42蛋白的单抗.用反义技术制备gp42蛋白表达抑制的3D5细胞.用免疫荧光染色和Western印迹确定gp42单抗的特异性.用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定gp42蛋白为分化抗原.用......
[期刊论文] 作者:汪燚,刘音,马凤蓉,史耕先,赵方萄,朱立平, 来源:中华微生物学和免疫学杂志 年份:2003
目的 明确 5C5蛋白为分化抗原 ,检测其在人免疫细胞的表达 ,以及它的信号传导作用。方法 用 5C5蛋白免疫小鼠 ,制备抗 5C5蛋白的单抗。用反义技术制备 5C5蛋白表达抑制的 3...
[期刊论文] 作者:汪哌,刘音,马凤蓉,史耕先,赵方萄,朱立平, 来源:中华微生物学和免疫学杂志 年份:2003
目的明确5C5蛋白为分化抗原,检测其在人免疫细胞的表达,以及它的信号传导作用. 方法用5C5蛋白免疫小鼠,制备抗5C5蛋白的单抗.用反义技术制备5C5蛋白表达抑制的3D5细胞.用免疫荧光染色和Western印迹确定5C5单抗的特异性.用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定其分......
[期刊论文] 作者:孟晓燕,汪燚,马凤蓉,史耕先,赵方萄,朱立平, 来源:基础医学与临床 年份:2001
为了确证5C5cDNA是全长cDNA并制备抗5C5分化抗原不同表位的功能性单抗, 进而研究5C5分化抗原的结构与功能,用Northern-blot检测5C5mRNA在人各种组织的表达,并构建了重组表达...
[期刊论文] 作者:岳玮,詹少兵,高阳,史耕先,刘音,赵方萄,朱立平, 来源:中国医学科学院学报 年份:2003
目的探讨6A8 α-甘露糖苷酶表达抑制对鼻咽癌细胞CNE-2L2间粘附性、细胞表达E-cadherin及对细胞接种裸鼠皮下所生长肿瘤肺转移的影响.方法软琼脂培养观察非锚定状态下细胞间...
[期刊论文] 作者:孟晓燕,汪炎炎,马凤蓉,史耕先,赵方萄,朱立平, 来源:黑龙江科技学院学报 年份:2004
为了确证5C5cDNA是全长cDNA并制备抗5C5分化抗原不同表位的功能性单抗, 进而研究5C5分化抗原的结构与功能,用Northern-blot检测5C5mRNA在人各种组织的表达,并构建了重组表达...
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