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[学位论文] 作者:刘子铎, 来源:华中农业大学 年份:2020
鉴于苏云金芽胞杆菌杀虫剂在农林害虫防治中占有重要地位,国外相继研制出了不同的高效工程菌杀虫剂。然而,我国目前仍处于使用天然菌株进行发酵生产的落后状况。因此,本研究围绕进一步提高苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白产量和杀虫活性,构建工程菌这一主题,进行了以下两......
[期刊论文] 作者:刘子铎,Zari.,A, 来源:微生物学报 年份:1999
以含有P19和cyt1A基因的以色列亚种72MD质粒的9.7kbHindⅢ片段为模板进行PCR扩增,分别获得了P19基因和cyt1A基因片段。与表达载体PUHE24连接转化大肠杆菌XL-1,获得3个克隆株。LZ19含有P19基因:pLZcyt1A含有cyt1A基因;LZ19A含有P19和cyt1A两个基因。利用cyt1A蛋白质可......
[期刊论文] 作者:刘子铎 Zari.,A, 来源:农业生物技术学报 年份:1997
[期刊论文] 作者:刘子铎,Mana.,R, 来源:遗传学报 年份:1999
为了证明苏云金芽胞杆菌以色列亚种20kDe蛋白质对CytA蛋白溶细胞作用的影响, 根据20kDe蛋白质和cytA蛋白基因的核苷酸序列,用AMPLIFY程序设计了一套带有酶切位 点的引物,经PCR扩增分别获得了20kDe蛋白质和cytA蛋白基因......
[期刊论文] 作者:孙明,刘子铎, 来源:微生物学报 年份:2000
通过Southern杂交发现高毒力苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)TBT-1520菌株含有两个杀虫晶体蛋白基因片段,其5’=末端所在HindⅢ片段分别为6.8kb和4.6kb,它们对应的基因分别命名为cry218和cry4.6。经PCR鉴定,该菌含有cry1Aa、cry1Ab和cry1Ac基因,以及cry2基因,其中cry218属于cry1Ac。......
[期刊论文] 作者:刘子铎,吴岚, 来源:微生物学杂志 年份:1997
在研究苏云金芽孢杆菌基因克隆和表达时,发现当以色列亚种P19和cytA蛋白基因的重组质粒转入大肠杆菌MV1190后,cytA蛋白基因起始密码上游第18位碱基至下游第48位碱基之间缺失约30个碱基,导致cytA蛋白生物活性......
[期刊论文] 作者:李林,刘子铎, 来源:农业生物技术学报 年份:1998
苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因的表达有复杂的调控机制,包括转录水平的调节,转录后水平的调节和翻译后水平的调节等方式。本文对近年来苏云金芽孢杆菌表达调控机制的研究进展......
[会议论文] 作者:郑嵘,刘子铎, 来源:第七届全国杀虫微生物学术讨论会 年份:1998
将含辅助蛋白基因p20穿梭质粒pBMB20-2电转化到对鳞翅目有特异毒力的野生型苏云芽孢杆菌YBT-803-1中,得到含p20蛋白的工程菌BMB20-4,该菌株发酵液的蛋白质含量YBT-803-1高1倍左...
[会议论文] 作者:李林,刘子铎, 来源:第七届全国杀虫微生物学术讨论会 年份:1998
对转座子mini-Tnl0在苏云金芽胞杆菌野生菌株YBT-1463及其无质粒突变株BMBI71中的转座作用进行了研究。结果表明,携带minix-Tn10的转座载体pHV1249能在菌株YBT-1463中复制,且对...
[会议论文] 作者:刘子铎;李林;, 来源:第七届全国杀虫微生物学术讨论会 年份:1998
根据限制性内切酶NcoI识别位点CCATGG含有结构基因起始密码(ATG)这一序列特征利用Amplify程序设计了一套含有Ncol位点的以色列亚种铺助蛋白基因P19和P20特异引物,通过PCR定点诱...
[期刊论文] 作者:鲁松清,刘子铎, 来源:遗传学报 年份:2000
用电脉冲方法将含有苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因cry1C的重组质粒pBMBLC转入野生菌株YBT833,获得含不同杀虫晶体蛋白基因的4个转化子。质粒检测和Southern杂交证明它们均为菌株YBT833含重组质粒pBMBLC的转化子。PCR扩......
[期刊论文] 作者:鲁松清,刘子铎, 来源:生物工程学报 年份:2000
利用电脉冲将cry1C基因转子苏云金孢杆菌野生菌株YBT1535,筛选得到3个转化子。质粒电泳、PCR扩增及Southern杂交结果均证明,基因cry1C已转入菌株YBT1535。生物测定结果表明,3个转化子对甜菜夜蛾的毒力比出发菌YBT1535均有显著......
[期刊论文] 作者:刘子铎,申宗候, 来源:武汉大学学报:自然科学版 年份:1993
本文以乌鱼(Ophrocepholus argus)肝为材料提纯了线粒体DNA.用四种限制性核酸内切酶:EcoR Ⅰ,BamH Ⅰ,Pst Ⅰ和Bgl Ⅱ分别进行完全酶解,各产生1、2、2、和2个片段.用六对限制...
[期刊论文] 作者:乐超银,刘子铎, 来源:微生物学报 年份:2000
将对鞘翅目昆虫有特异毒性的苏云芽孢杆菌cry3A基因电转化到只对鳞翅目昆虫有毒性的苏云金芽孢杆菌野隆型菌株YBT803-1中,获得转了BMBY-001。SDS-PAGE分析及镜检结果表明,cry3A基因可在该菌株中高效表达,但出发菌株......
[期刊论文] 作者:吕颂雅,刘子铎, 来源:水生生物学报 年份:1999
将苏云金胞杆菌以色列亚种的杀蚊晶体蛋白基因cry11A亚克隆到大肠杆菌-蓝藻的穿梭质粒载体pERL25C然后用三亲本杂交的方法将重组质粒转移到一种具有固氮能力且可被蚊幼虫蚕食的鱼腥藻(Anabaena)PCC7120中,Southernblot及Westernblot分......
[期刊论文] 作者:刘子铎,喻子牛, 来源:昆虫学报 年份:2000
综合叙述了苏云金芽地菌Bacillus thuringiensis和杀虫晶体蛋白的作用机制及在不同水平上解释这些机制的一些流行模型和有关亚分子结构的作用。...
[期刊论文] 作者:刘子铎,王鄂生, 来源:氨基酸杂志 年份:1989
本文报道一种简易分离纯化线粒体DNA(mtDNA)的方法。即以差速离心或蔗糖梯度离心制得线粒体后,用RNase除去RNA,可得纯mtDNA,或用凝胶过滤、或低熔点琼脂糖法纯化之。所获纯mt...
[期刊论文] 作者:刘子铎,汤江武, 来源:微生物学报 年份:1998
用DIG标记的cry1Aa基因EcoRI-F片段的RNA探针,对筛选的鳞翅目高毒力菌株的质粒进行Southern分析,将cry基因定位在39.3MD质粒上。该质粒经HindⅢ酶解,用同样探针进行杂交,呈现6.5kb和7.1kb两条阳性带,其中7.1kb片段的杂交强度明显高于6.5kb片段。......
[期刊论文] 作者:刘子铎,林黎阳, 来源:微生物学杂志 年份:1997
根据PCR程序中热变性温度可使菌体裂解,释放出DNA的原理,利用苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白不同基因型的特异混合引物,对苏云金芽孢杆菌营养体直接进行PCR分析。根据不同基因型的特异扩增产......
[期刊论文] 作者:刘子铎,洪玉枝, 来源:农业生物技术学报 年份:1993
本文用DIG标记的cryI基因E.coRI-F片段的RNA探针,对鳞翅目高毒力菌株苏云金芽胞杆菌YBT-803质粒的BamHI/PstI酶解产物进行了Southern分析,将含有cryl基因的7.9kb和4.4kb的阳...
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