人NOB1基因shRNA慢病毒载体构建与RNAi效率的鉴定

来源 :吉林大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heermeisi
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目的:构建人NOB1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并在卵巢癌SKOV3和HEY细胞上鉴定其沉默效率。方法:针对NOB1基因设计特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pLVTHM载体,筛选获得的有效shRNA慢病毒载体在293T细胞包装成病毒颗粒,随后将其感染卵巢癌SKOV3和HEY细胞,采用Real-timePCR方法检测靶基因在mRNA水平的沉默效率。结果:构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确,包装病毒后滴度达到8×108PU·L^-1。shRNA慢病毒颗粒感染S
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