【摘 要】
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目的建立检测HBV共价闭合环状（cccDNA）的巢式-荧光定量PCR法,检测外周血单核细胞（PBMC）及骨髓单核细胞（MMNC）中cccDNA。方法根据HBV cccDNA与松弛结构DNA（rcDNA）结构上的差异,设计2对
【机 构】
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哈尔滨医科大学第二附属医院,解放军第二军医大学长海医院
【基金项目】
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黑龙江省自然基金资助(D200644)
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目的建立检测HBV共价闭合环状（cccDNA）的巢式-荧光定量PCR法,检测外周血单核细胞（PBMC）及骨髓单核细胞（MMNC）中cccDNA。方法根据HBV cccDNA与松弛结构DNA（rcDNA）结构上的差异,设计2对跨缺口的特异性引物及下游的特异性TaqMan探针。根据Mung Bean Nuclease对rcDNA与cccDNA作用的不同,使cccDNA扩增而使rcDNA降解,分别用外引物及内引物进行PCR反应,再用荧光探针进行实时荧光定量PCR,根据阳性参照物,计算出检测标本定量值。结果成功建
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