目的 研究常规化疗药物对纯化的胃癌CD133+细胞亚群的作用及对相关凋亡基因Bcl-2和BAX的mRNA表达的影响,进而探讨胃癌耐药的作用机制.方法 采用免疫磁珠分选术分离纯化KATO-Ⅲ细胞株中CD133+和CD133细胞亚群.采用CCK-8法分析两种亚群细胞对不同化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂及依托泊苷(VP-16)敏感性的差别.行半定量聚合酶链反应分析化疗药物诱导后相关凋亡基因表达产物的表达差异.结果 KATO-Ⅲ细胞磁珠分选纯化后,经流式细胞仪分析结果显示:分选后CDI33+组所得细胞CD133+表达率为90％.5-FU、顺铂及VP-16分别作用12h后,CD133+组及CD133-组均开始出现凋亡的形态学改变.CCK-8检测发现CD133+组细胞生长抑制比率较CD133-组有一定程度的下降[5-FU组为:(30.56±1.99)％ ～ (88.60±1.95)％ vs(32.81±2.67)％ ～ (35.55±3.23)％,P =0.045；顺铂组为:(45.89±3.64)％ ～ (81.20±1.18)％ vs(50.21 ±3.22)％ ～(90.46±1.89)％,P=0.043; VP-16组为:(37.21±3.80)％ ～ (78.49±3.22)％ vs (35.55±3.23)％ ～ (89.32±3.54)％,P=0.048].3种化疗药物干预后,两组亚群细胞中均呈现凋亡抑制因子Bcl-2 mRNA表达降低,凋亡因子BAXmRNA表达升高.这些变化在CD133+组中较CD133组中更为明显.结论 胃癌CD133+细胞亚群对5-FU、顺铂及VP-16具有一定耐药潜能.可能是由于BAX基因上调及Bcl-2基因下调进而诱导胃癌CD133+细胞亚群凋亡,并由此而获得对肿瘤药物的抵抗性。
化疗药物对胃癌CD133+细胞亚群的作用及其对相关凋亡基因表达的影响
【摘 要】
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目的 研究常规化疗药物对纯化的胃癌CD133+细胞亚群的作用及对相关凋亡基因Bcl-2和BAX的mRNA表达的影响,进而探讨胃癌耐药的作用机制.方法 采用免疫磁珠分选术分离纯化KATO-Ⅲ细胞株中CD133+和CD133细胞亚群.采用CCK-8法分析两种亚群细胞对不同化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂及依托泊苷(VP-16)敏感性的差别.行半定量聚合酶链反应分析化疗药物诱导后相关凋亡基因表达产
【机 构】
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201900上海,上海交通大学医学院附属第三人民医院普外一科,201900上海,上海交通大学医学院附属第三人民医院普外一科,201900上海,上海交通大学医学院附属第三人民医院普外一科,201900上
【出 处】
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国际外科学杂志
【发表日期】
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2013年40期
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