何首乌ISSR—PCR反应体系的建立与优化

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目的建立和优化ISSR—PCR反应体系。方法通过单因素实验研究ISSR反应体系中主要成分(模板、TaqDNA聚合酶、Mg^2+、引物、dNTPs)以及退火温度对扩增结果的影响。结果建立了适合何首乌ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μl反应体系中,内含1×Taq酶配套缓冲液、100ng模板、1.5UTaqDNA聚合酶、1、5mmol/LMg^2+、0.6μmol/L引物、0.2mmol/LdNTPs。扩增程序为94℃预变性5min;然后是94℃变性45s,(据不同引物的退火温度)复性1mi
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