【摘 要】
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为构建东方马脑炎病毒E2基因原核表达载体,完成E2蛋白表达及其免疫活性研究。利用PCR方法扩增E2编码全基因,大小为1 260 bp,将酶切后目的片段连接到原核表达载体pET-30a（＋）上,构
【机 构】
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黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,军事医学科学院军事兽医研究所,东北农业大学动物医学学院
【基金项目】
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公益性行业（农业）科研专项（201103032）, “十一五”国家科技支撑计划重点项目（2010BAD04B03）
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为构建东方马脑炎病毒E2基因原核表达载体,完成E2蛋白表达及其免疫活性研究。利用PCR方法扩增E2编码全基因,大小为1 260 bp,将酶切后目的片段连接到原核表达载体pET-30a（＋）上,构建成重组质粒pET30a（＋）-EEEV-E2,采用酶切和测序分析方法鉴定正确的重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,诱导E2蛋白表达,并用SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析和鉴定目的蛋白;最后,用纯化的E2蛋白免疫BALB/c小鼠,小鼠随机分成4组：PBS对照组、弗氏佐剂对照组、E2蛋白免疫组
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