碳酸酐酶在多孔玻璃上的固定化及性质研究

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将牛碳酸酐酶共价固定到多孔玻璃CPG上,拟应用于烟道气中CO2的强化吸收。多孔玻璃经过烷基化和戊二醛活化后,与酶共价结合。以p-硝基苯乙酸酯水解活力来表示碳酸酐酶的活性,在最优固定化pH=8.0下,固定化酶的活力为1.32U/g CPG,固定化酶载量为14.7mg/g CPG,固定化效率因子为0.334。测得固定化酶的米氏动力学参数k2和Km的值分别是258min-1和259×10-4 mol/L,分别是游离酶的61.7%和2.23倍。以pH=7.85和40℃时的酶活作为比较标准,当pH>7.85和T>40℃时,固定化酶的性质优于游离酶。在pH=10和40℃下,固定化酶的活性似乎不稳定,在7天内下降为原来的37%。然而,以压力法测得的CO2水合活力表示酶的活性,在上述条件下,固定化酶却很稳定,活性在21天内几乎没有变化,表明酯酶活力法测定酶活不能用来评估CPG-固定化碳酸酐酶的稳定性。
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