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目的 为提高间充质干细胞(MSCs)表达神经生长因子(NGF)的能力,同时使MSCs被绿色荧光蛋白(GFP)稳定标记,探讨通过病毒载体将NGF和GFP基因高效转染到MSCs的方法.方法取2个月龄100~150 g Wistar大鼠,全骨髓法分离培养纯化大鼠MSCs,利用携带人NGFβ基因的复制缺陷性重组腺病毒(Ad-hNGFβ)和携带GFP基因的复制缺陷性逆转录病毒(Rt-GFP)转染MSCs,荧光显微镜观察GFP阳性的MSCs,免疫细胞化学和Western blot检测hNGFβ的表达.结果Rt-GFP转染后,80%~90%MSCs可激发出明亮的绿色荧光,且荧光不随培养时间延长和传代次数增加而衰减.Ad-hNGFβ的转染MSCs中hNGFβ阳性率(90.17±2.14)显著高于阴性对照组(2.17±0.75,P<0.01)和空白对照组(1.83±0.98,P<0.01),转染后MSCs中NGFβ表达量(188.67±8.71)显著高于阴性对照组(25.67±4.08,P<0.01)和空白对照组(27.50±3.33,P<0.01).结论Ad-hNGFβ可以高效转染MSCs,实现NGF在MSCs中高效表达,Rt-GFP可以使MSCs获得长效标记。