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采用正交设计法对影响关花石斛SSR—PCR体系的5个主要因素进行了优化,建立适宜的美花石斛SSR-PCR的反应体系,并利用黔产5个不同的美花石斛居群共计48株进行了验证。结果表明;在10岸L的美花石斛的反应体系中各因素的最佳浓度分别为2.0mmol/LMg^2+,0.4mmol/LdNTP,1.5U Taq酶,O.4μmol/L引物,40ng模板DNA,建立的SSR-PCR体系可用于美花石斛的遗传多样性研究。