梅毒螺旋体重组抗原TmpA的表达及其在梅毒诊断中的应用

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目的 用基因工程方法表达梅毒螺旋体的TmpA重组抗原 ,建立检测梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验 (EIA)。方法 用聚合酶链反应 (PCR)扩增梅毒螺旋体TmpA基因 ,克隆到原核表达载体 pQE 30中表达 ,用亲和层析柱法纯化该重组抗原 ,并用其建立检测梅毒螺旋体抗体的EIA。 结果 表达的重组抗原相对分子质量约为 390 0 0 ,具有良好的抗原性。用其建立的EIA检测 10份阳性参比血清 ,均为阳性 ,灵敏度为 10 0 % ;检测 2 0份阴性参比血清 ,均为阴性 ,特异性为 10 0 %。检测12份Ⅰ期梅毒 (早期感染 )和 2 4份Ⅱ期和晚期梅毒患者血清 ,阳性率分别为 91.6 7% (11/ 12 )和 10 0 %(2 4/ 2 4)。结论 用该重组抗原建立的EIA可检出 97.2 % (35 / 36 )以上梅毒患者 ,仅 2 .8% (1/ 36 )漏检。为进一步提高该试剂的灵敏度 ,可能需增加梅毒螺旋体的其它重组抗原
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