【摘 要】
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目的:本研究旨在探讨微小RNA-339(miR-339)在肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖中的作用并探讨其潜在机制。方法:利用不同浓度的血管紧张素Ⅱ处理PASMCs 48 h,通过转染miR-339模
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.81100134)
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目的:本研究旨在探讨微小RNA-339(miR-339)在肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖中的作用并探讨其潜在机制。方法:利用不同浓度的血管紧张素Ⅱ处理PASMCs 48 h,通过转染miR-339模拟物(miR-339mimic)和miR-339抑制物(miR-339 inhibitor)分别使miR-339过表达或低表达,利用CCK-8法和活细胞计数检测细胞的增殖能力;利用RT-qPCR检测miR-339和PCNA mRNA的表达水平;利用Western blot检测蛋白水平;萤光素酶报告试验分析证实miR-339和IGF2BP1之间的相互作用。结果:血管紧张素II浓度依赖性地增加PASMCs的增殖和PCNA的mRNA表达,并降低miR-339的表达(P <0. 05)。miR-339过表达抑制PASMCs增殖和PCNA mRNA表达(P <0. 05),而miR-339表达下调则促进PASMCs的增殖和PCNA的mRNA表达(P <0. 05)。miR-339表达上调可以抑制血管紧张素II处理后的PASMCs的增殖(P <0. 05)。生物信息学分析以及萤光素酶报告试验检测证实胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)的3’-UTR为miR-339靶点,进一步用RT-qPCR及Western blot实验发现miR-339负调控PASMCs中IGF2BP1的表达(P <0. 05)。IGF2BP1的过表达减弱了miR-339对PASMCs增殖和PCNA mRNA表达的抑制作用(P <0. 05)。miR-339 mimic转染可以抑制磷酸化p38蛋白的水平(P <0. 05),对p38蛋白的水平没有影响。结论:miR-339对PASMCs的增殖起抑制作用,这种抑制作用可能是部分通过调控IGF2BP1以及p38 MAPK信号通路来实现的。
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